[发明专利]干细胞的扩增和分化

权利要求书

1.一种由间充质干细胞(MSC)形成中胚层谱系的细胞的方法，所述方法包括：

使MSC与下列物质接触：

(i)至少一种用于诱导由MSC形成中胚层谱系的细胞的分化因子；以及

(ii)弹性蛋白原，

其中存在弹性蛋白原时由MSC形成的中胚层谱系的细胞数目大于不存在弹性蛋白原时形成的中胚层谱系的细胞数目，

从而由MSC形成中胚层谱系的细胞。

2.根据权利要求1所述的方法，其中将所述弹性蛋白原布置在细胞培养容器的细胞培养表面上，以使得当所述MSC与所述细胞培养表面接触时，所述MSC能够接触所述弹性蛋白原。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述弹性蛋白原部分地或完全地溶解在用于培养MSC的细胞培养基中。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法还包括：

(i)当不存在诱导分化的因子时，使MSC与弹性蛋白原接触以诱导MSC的增殖，从而形成MSC群；以及

(ii)使所述MSC群与至少一种分化因子接触，以诱导由MSC和弹性蛋白原形成中胚层谱系的细胞。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法还包括：

(i)在含有弹性蛋白原的第一培养基中培养MSC，以形成经弹性蛋白原培养的MSC群；以及

(ii)在第二培养基中培养所述经弹性蛋白原培养的MSC群，其中所述第二培养基包含至少一种用于诱导MSC分化的分化因子。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述弹性蛋白原不与丝蛋白一起提供。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述弹性蛋白原以部分或完全可溶的、与透明质酸的复合物的形式提供，其中通过透明质酸将弹性蛋白原单体连接在一起。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述弹性蛋白原与所述透明质酸交联。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述中胚层谱系的细胞为骨细胞、软骨细胞或脂肪细胞。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述MSC为人MSC。

11.一种细胞的组合物，所述细胞通过根据前述权利要求中任一项所述的方法而形成。

12.根据权利要求11所述的组合物，其中所述组合物为基本上纯的骨细胞形式。

13.根据权利要求11或权利要求12所述的组合物，其中所述组合物包含弹性蛋白原和/或透明质酸。

14.根据权利要求13所述的组合物，其中所述弹性蛋白原与所述透明质酸交联。

15.一种治疗患有骨病或骨折的个体的方法，所述方法包括：

向所述个体提供根据权利要求11至14中任一项所述的组合物，从而治疗所述个体的骨病或骨折。

16.根据权利要求15所述的方法，其中向所述个体提供所述组合物，其中提供给所述个体的所述组合物中的MSC的总量为至少一百万至两百万个细胞/千克所述个体的体重。

17.根据权利要求15所述的方法，其中向所述个体提供所述组合物，其中提供给所述个体的所述组合物中的MSC的总量为至少一百万至两百万个细胞，并且其中将所述组合物施用至局部部位。

18.一种包含弹性蛋白原的细胞培养基，其中所述细胞培养基不包含胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和/或碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。