[发明专利]监测疤痕形成的装置和方法

权利要求书

1.一种用于产生能够形成疤痕的离体皮肤样品的方法，包含：

(a)培养不受束缚地浸没在液体培养物中的全厚度皮肤样品；

(b)确定是否在步骤(a)中通过全厚度皮肤样品形成疤痕；和

(c)获得结疤的全厚度皮肤样品，

其中所述全厚度皮肤样品包含筋膜。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述全厚度皮肤样品进一步包含表皮、真皮、皮下层。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述全厚度皮肤样品从哺乳动物获得。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述全厚度皮肤样品是打孔的活体组织切片。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述打孔的活体组织切片来自背部区域。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述全厚度皮肤样品是新鲜样品。

7.根据权利要求3至6中任一项所述的方法，其中所述哺乳动物是小鼠或人类。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述小鼠处于至少E18.5的发育胎儿阶段直到新生儿阶段P10。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述全厚度皮肤样品的平均厚度为约1至3mm。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述液体培养物是悬浮培养物。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中将所述全厚度皮肤样品培养至少4天。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中通过使用包含10％FBS、1xGlutaMAX、1x青霉素/链霉素和1x MEM非必需氨基酸的DMEM/F-12培养基进行培养。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，包含确定所述全厚度皮肤样品是否含有表达CK14、Engrailed-1、CD26、N-钙粘蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞特异性蛋白1(FSP1)和/或源自血小板的生长因子受体α(PDGFRα)和生长因子受体β(PDGFRβ)的细胞。

14.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，包含确定所述全厚度皮肤样品是否含有表达α-SMA、CD90、ER-TR7、PDGFRα、Sca1、βIII微管蛋白、CD31、MOMA-2、F4/80、CD24、CD34、CD26、DIk1、Fn1、Col14a1、Emilin2、Gsn和/或Nov的细胞。

15.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中在步骤(b)中，通过目视检查完成确定是否在步骤(a)中通过所述全厚度皮肤样品形成疤痕。

16.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中在步骤(b)中，确定是否在步骤(a)中通过所述全厚度皮肤样品形成疤痕，包含确定I型胶原蛋白、III型胶原蛋白和/或纤连蛋白是否存在于所述全厚度皮肤样品中。

17.一种筛选其调节疤痕形成的化合物的方法，包含：

(a)在感兴趣的化合物的存在下进行根据权利要求1至16中任一项所述的方法；和

(b)与在不存在所述感兴趣的化合物的情况下进行根据权利要求1至16中任一项所述的方法相比，确定所述感兴趣的化合物是否调节疤痕形成。

18.根据权利要求17所述的方法，其中疤痕形成的调节是抑制疤痕形成或促进疤痕形成。