[发明专利]生物工程化的华通氏胶衍生的细胞外基质

权利要求书

1.一种多孔基质，其包含中位孔隙尺寸范围为约200μm至约350μm的模制的脱细胞华通氏胶基质(DWJM)。

2.如权利要求1所述的多孔基质，其中所述中位孔隙尺寸的范围为约230μm至约330μm。

3.如权利要求1所述的多孔基质，其中所述中位孔隙尺寸为约235μm、约275μm、约290μm、约300μm、约310μm、约320μm或约330μm。

4.如权利要求1-3中任一项所述的多孔基质，其中孔隙尺寸分布不超过所述中位孔隙尺寸的50％或17％。

5.如权利要求1-4中任一项所述的多孔基质，具有介于约80％与95％之间的体积孔隙率。

6.如权利要求1-5中任一项所述的多孔基质，还包含均匀分布的选自由以下组成的组的基质组分：胶原蛋白、纤连蛋白、肌腱蛋白C(TN-C)、原纤蛋白、基膜聚糖蛋白、透明质酸(HA)、多功能蛋白聚糖、纤维蛋白原γ链、肌球蛋白-9、肌球蛋白-10、paladin、细丝蛋白、纽蛋白、膜突蛋白、骨膜蛋白、层粘连蛋白、踝蛋白-1以及它们的组合。

7.如权利要求1-6中任一项所述的多孔基质，所述多孔基质的纤维蛋白原γ链丰度比在约30与35之间。

8.如权利要求1-7中任一项所述的多孔基质，所述多孔基质的肌球蛋白-9丰度比在约10与15之间。

9.如权利要求1-8中任一项所述的多孔基质，所述多孔基质的肌球蛋白-10丰度比在约10与15之间。

10.如权利要求1-9中任一项所述的多孔基质，其中所述基质被模制或修剪成尺寸适合于细胞培养孔的圆盘形状。

11.如权利要求1-10中任一项所述的多孔基质，所述多孔基质还包含至少一个接种的细胞的群体。

12.如权利要求1-11中任一项所述的多孔基质，所述多孔基质还包含至少一种治疗剂。

13.一种制备生物工程化的基质的方法，所述方法包括以下步骤：

将脱细胞的华通氏胶基质(DWJM)浸渍在液体介质中；

对浸渍的DWJM执行一个或多个均化循环以形成均化的DWJM，每个均化循环均包括均化期和休止期；

使所述均化的DWJM成形；

将所述均化的DWJM冷冻；以及

将冷冻的所述DWJM在真空下冻干以形成生物工程化的基质。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述液体介质是蒸馏水。

15.如权利要求13-14中任一项所述的方法，其中对保存在冰上的浸渍的DWJM执行所述一个或多个均化循环。

16.如权利要求13-15中任一项所述的方法，其中每个均化循环包括约30秒的均化期和约120秒的休止期。

17.如权利要求13-16中任一项所述的方法，其中每个均化周期包括在所述浸渍的DWJM中激活分散混合器。

18.如权利要求13-17中任一项所述的方法，其中执行至少30个均化循环。

19.如权利要求13-18中任一项所述的方法，其中使用3D打印来使所述均化的DWJM成形。

20.如权利要求13-19中任一项所述的方法，其中使用模具使所述均化的DWJM成形。