[发明专利]改良多抗原特异性细胞疗法方法

权利要求书

1.一种制备活化T细胞群的方法，所述方法包括：

a)使树突细胞群与多种肿瘤抗原肽接触以获得载有所述多种肿瘤抗原肽的树突细胞群；

b)在包含多种细胞因子和免疫检查点抑制剂的初始共培养基中共培养载有所述多种肿瘤抗原肽的所述树突细胞群和T细胞群以提供共培养物；以及

c)在所述共培养开始后5天，将抗CD3抗体添加至所述共培养物，从而获得所述活化T细胞群。

2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤a)还包括在包含toll样受体(TLR)激动剂的DC成熟培养基中培养载有所述多种肿瘤抗原肽的所述树突细胞群。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述TLR激动剂选自MPLA、聚肌胞苷酸、雷西莫特、嘎德莫特和CL075。

4.一种制备活化T细胞群的方法，所述方法包括：

a)使树突细胞群与多种肿瘤抗原肽接触以获得载有所述多种肿瘤抗原肽的树突细胞群；

b)在包含浓度为0.5至10μg/mL的MPLA、浓度为100IU/mL至1000IU/mL的干扰素γ(INFγ)和浓度为0.1至0.5μg/mL的PGE2的DC成熟培养基中培养载有所述多种肿瘤抗原肽的所述树突细胞群；以及

c)共培养载有所述多种肿瘤抗原肽的所述树突细胞群和T细胞群，从而获得所述活化T细胞群。

5.根据权利要求2所述的方法，其中所述DC成熟培养基包含INFγ和MPLA。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述DC成熟培养基还包含PGE2。

7.根据权利要求5所述的方法，其中所述INFγ以100IU/mL至1000IU/mL的浓度存在于所述DC成熟培养基中。

8.根据权利要求3、5和6中任一项所述的方法，其中所述MPLA以0.5μg/mL至10μg/mL的浓度存在于所述DC成熟培养基中。

9.根据权利要求6所述的方法，其中所述PGE2以0.1μg/mL至0.5μg/mL的浓度存在于所述DC成熟培养基中。

10.根据权利要求1所述的方法，其中步骤c)包括：在包含多种细胞因子和免疫检查点抑制剂的初始共培养基中共培养载有所述多种肿瘤抗原肽的所述树突细胞群和T细胞群以提供共培养物；并且将抗CD3抗体添加至所述共培养物，从而获得所述活化T细胞群。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述多种细胞因子包括IL-2、IL-7、IL-15和IL-21。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述IL-2以至少500IU/mL的浓度存在于所述初始共培养基中。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述免疫检查点抑制剂是抗PD-1抗体。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述抗PD-1抗体以至少10μg/mL的浓度存在于所述初始共培养基中。

15.根据权利要求1所述的方法，其中将载有所述多种肿瘤抗原肽的所述树突细胞群和所述T细胞群在所述抗CD3抗体存在下共培养至少10天。

16.根据权利要求1或4所述的方法，其中所述T细胞群存在于PBMC群中。

17.根据权利要求1或4所述的方法，其中通过诱导从PBMC分化单核细胞群来获得所述树突细胞群。

18.根据权利要求1或4所述的方法，其中所述树突细胞群和所述T细胞群从相同个体获得。