[发明专利]微生物分离和检测

权利要求书

1.一种将含有非微生物细胞的样品中的微生物与非微生物细胞分离的方法，所述方法包括：

a)将所述样品用颗粒孵育以形成颗粒-微生物复合物，其中所述孵育步骤在聚茴香脑磺酸钠和/或选择性裂解所述样品中的非微生物细胞同时保持所述样品中存在的微生物完整的试剂的存在下进行；以及

b)将所述颗粒-微生物复合物与所述非微生物细胞分离。

2.一种将含有非微生物细胞的样品中的微生物与非微生物细胞分离的方法，所述方法包括：

a)将所述样品用颗粒孵育以形成颗粒-微生物复合物；以及

b)将所述颗粒-微生物复合物与所述非微生物细胞分离；

其中所述颗粒具有未被以下中的任何一者包覆的外表面：(i)抗体，(ii)碳水化合物，(iii)由载脂蛋白H蛋白衍生的肽，(iv)甘露糖结合凝集素蛋白。

3.一种检测也包含非微生物细胞的样品中是否存在微生物的方法，所述方法包括：

a)将所述样品用颗粒孵育以形成颗粒-微生物复合物，其中所述孵育步骤在聚茴香脑磺酸钠和/或选择性裂解所述样品中的非微生物细胞同时保持所述样品中存在的微生物完整的试剂的存在下进行；

b)将所述颗粒-微生物复合物与所述非微生物细胞分离；以及

c)检测所述颗粒-微生物复合物中是否存在微生物。

4.一种检测也包含非微生物细胞的样品中是否存在微生物的方法，所述方法包括：

a)将所述样品用颗粒孵育以形成颗粒-微生物复合物；

b)将所述颗粒-微生物复合物与所述非微生物细胞分离；以及

c)检测所述颗粒-微生物复合物中是否存在微生物；

其中所述颗粒具有未被以下中的任何一者包覆的外表面：(i)抗体，(ii)碳水化合物，(iii)由载脂蛋白H蛋白衍生的肽，(iv)甘露糖结合凝集素蛋白。

5.根据权利要求2或权利要求4所述的方法，其中所述孵育步骤在聚茴香脑磺酸钠和/或选择性裂解所述样品中的非微生物细胞同时保持所述样品中存在的微生物完整的试剂的存在下进行。

6.根据权利要求3至5中任一项所述的方法，其中步骤(c)包括：(i)检测与所述微生物相关的核酸分子的酶活性，(ii)通过细胞计数或显微术直接检测所述微生物，(iii)细胞培养后检测所述微生物，(iv)通过核酸扩增检测所述微生物，或(v)通过核酸测序检测所述微生物。

7.根据权利要求3至5中任一项所述的方法，其中步骤(c)包括以下步骤：

i)将所述颗粒-微生物复合物中的所述微生物裂解；

ii)将裂解物用核酸分子孵育，所述核酸分子充当用于所述微生物的核酸修饰活性的底物；以及

iii)具体确定由所述核酸修饰酶对所述底物核酸分子的作用产生的经修饰的核酸分子是否存在，以指示所述微生物是否存在。

8.根据权利要求7所述的方法，其中步骤(i)包括加入包含所述底物核酸分子的裂解试剂。

9.根据权利要求7或权利要求8所述的方法，其中所述核酸修饰酶包括DNA或RNA聚合酶，任选地其中所述DNA聚合酶为DNA聚合酶I。

10.一种检测受试者中是否存在微生物感染的方法，所述方法包括对来自所述受试者的样品进行权利要求3至9中任一项所述的方法。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法还包括洗涤所述分离的颗粒-微生物复合物以除去非微生物细胞或裂解物。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤b)还包括从所述颗粒-微生物复合物中除去所述非微生物细胞。

13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤b)使用磁场或离心进行。