[发明专利]包含接头材料和量子点珠的生物传感器以及使用其的目标抗原检测方法

说明书

本公开的一个方面涉及用于生物样品中目标抗原的免疫色谱检测方法，包括相对于目标抗原，连接具有第一抗体的接头和具有第二抗体的量子点珠的步骤。通过使用量子点珠和接头，方法可以通过简单过程成功放大检测强度并显著提高检测灵敏度，而不会导致仅使用量子点珠时参与检测的抗原的损失。此外，本公开可以显著放大检测强度而无需额外的清洗步骤，因此使得能够优异地检测和鉴别生物样品中，甚至实际产品中的生理学物质，并且可以用于提供具有竞争力价格的产品。

技术领域

本公开涉及包含接头荧光物质和量子点珠的生物传感器以及使用其的目标抗原检测方法。

背景技术

近年来，疾病变得多样化并且正在广泛研究并揭示存在于生物样品，如血液或尿液中的生理学物质和受试者的疾病或身体状况之间的关系。在该过程期间，需要可以快速、准确且容易地检测和鉴别生物样品中疾病相关生理学物质的技术。

作为检测生理学物质的代表性技术，存在使用用于生理学物质的生物标志物的免疫测定技术，如酶联免疫吸附测定(ELISA)、放射免疫测定(RIA)和免疫印迹等。然而，这些技术复杂、耗时且昂贵，并且需要大量人力。另一方面，侧流免疫测定是使用纳米颗粒的夹层免疫测定技术，其可以容易且快速地检测生物样品中的分析物并具有低生产成本，并因此已主要在诊断测试领域中长期使用。

侧流免疫测定中常用的荧光物质是与生理学物质形成免疫复合物并且通过独特的等离子体振子现象而显示出红色的金纳米颗粒。由于这些特征，这些荧光物质具有易于通过肉眼从真实产品中检测和鉴别生理学物质的存在或不存在的优势。

然而，当使用金纳米颗粒时，由于检测基于目测评价，因此灵敏度不出色并且分析灵敏度较低，并因此金纳米颗粒主要应用于血液中过量存在的生理学物质。因此，由于检测或测量血液中以极低浓度存在的生理学物质的困难，因此对于疾病的早期诊断存在限制。另外，存在其中生理学物质定量分析困难的问题。

因此，为了检测低浓度的生理学物质，继续进行了放大在侧流免疫测定中使用的荧光物质的检测强度的工作。作为这些工作之一，国际专利公开第WO 2008-071345号公开了使用与胶体金纳米颗粒互补的核苷酸来堆积金纳米颗粒，借此放大它们的荧光强度。

然而，根据上述技术，具有互补核苷酸的金纳米颗粒可以在与生理学物质，如抗原结合前彼此组合，并且当同时添加金纳米颗粒时，它们结块。这种结块现象干扰生物样品在侧流免疫测定中的流动，从而使目标生理学物质的检测困难。为了防止这种现象，在具有不同核苷酸的金纳米颗粒的注射之前，除去通常存在的纳米颗粒的清洗步骤是必需的。因此，为了应用于真实侧流传感器，在将新的金纳米颗粒加入至传感器之前需要清洗步骤，并因此上述技术在对实际传感器的应用中具有限制。

因此，本公开的发明人提供了使用接头和量子点珠的检测方法作为在侧流免疫测定中稳定且非常显著地放大检测荧光强度的技术，而无需单独的清洗步骤。

[参考文献]

1.US2010-0068727 A1

2.WO2008-071345 A1

发明内容

本公开的多种实施方式提供了通过使用无需单独清洗步骤的非常简单的方法来显著放大检测强度，从而显著改善检测生理学物质的方法中的灵敏度的免疫色谱检测方法，和使用检测方法的诊断方法或侧流免疫传感器。

根据本公开的一个方面，用于生物样品中的目标抗原的免疫色谱检测方法可以包括通过目标抗原，将具有第一抗体的接头结合至具有第二抗体的量子点珠。

根据本公开的一个方面，可以在诊断目标抗原相关疾病、病症或病况的方法中、在用于检测生理学物质的侧流免疫传感器中和在生物诊断试剂盒中使用免疫色谱检测方法。