[发明专利]检测癌症患者中肿瘤抗原的诊断性测定法

权利要求书

1.一种用于确定样品中肿瘤细胞的存在的诊断性测定法，所述诊断性测定法包括以下步骤：

a)使所述样品与表达报告T(CAR-T)细胞的嵌合抗原受体(CAR)接触，其中所述报告CAR-T细胞包含：

i.能够与所述肿瘤细胞特异性结合的CAR，其中，所述CAR可操作地偶联至响应元件；

ii.在所述响应元件控制下的报告基因；以及

b)通过测量所述报告基因的表达来测定T细胞的激活以确定所述肿瘤细胞的存在。

2.根据权利要求1所述的诊断性测定法，其特征在于，所述CAR包含能够与肿瘤靶抗原特异性结合的靶抗原结合部分。

3.根据权利要求2所述的诊断性测定法，其特征在于，所述靶抗原结合部分是Fab片段。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的诊断性测定法，其特征在于，所述报告CAR-T细胞是Jurkat细胞。

5.根据权利要求2至4中任一项所述的诊断性测定，其特征在于，所述肿瘤靶抗原是细胞表面抗原和/或受体。

6.根据权利要求2或5中任一项所述的诊断性测定法，其特征在于，所述肿瘤靶抗原选自由CD20、CD38、CD138、CEA、EGFR、FolR1、HER2、LeY、MCSP、STEAP1、TYRP1和WT1或其片段组成的组。

7.根据权利要求2至6中任一项所述的诊断性测定法，其特征在于，所述肿瘤靶抗原是与人类主要组织相容性复合体(MHC)的分子结合的肽。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的诊断性测定法，其特征在于，所述CAR包含至少一个细胞内刺激信号传导和/或共刺激信号传导结构域。

9.根据权利要求8所述的诊断性测定法，其特征在于，所述细胞内信号传导和/或共信号传导结构域的激活导致所述响应元件的激活。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的诊断性测定法，其特征在于，所述响应元件的激活导致所述报告基因的表达。

11.根据实施例1至10中任一项所述的诊断性测定法，其特征在于，所述响应元件是NFAT途径、NF-κB途径或AP-1途径的一部分。

12.根据实施例1至11中任一项所述的诊断性测定法，其特征在于，所述报告基因编码发光蛋白。

13.根据实施例1至12中任一项所述的诊断性测定法，其特征在于，所述报告基因编码绿色荧光蛋白(GFP)或荧光素酶。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的诊断性测定法，其特征在于，所述样品是源自患有疾病的个体的患者样品，特别是其中所述疾病是癌症。

15.一种预测抗肿瘤CAR-T细胞治疗疗效的方法，所述方法包括提供来自患有肿瘤的受试者的样品，以及根据实施例1至15中任一项所述的诊断性测定法，通过测量所述报告基因的表达来确定T细胞激活，其中所述报告基因的激活指示所述抗肿瘤CAR-T细胞治疗在应用于所述受试者时的疗效。