[发明专利]新颖CAS9直系同源物

权利要求书

1.一种合成的组合物，所述合成的组合物包含异源组分和Cas内切核酸酶，其中所述Cas内切核酸酶包含至少一种选自下组的氨基酸特征，该组由以下组成：

(a)位置13处的异亮氨酸(I)，

(b)位置21处的异亮氨酸(I)，

(c)位置71处的亮氨酸(L)，

(d)位置149处的亮氨酸(L)，

(e)位置150处的丝氨酸(S)，

(f)位置444处的亮氨酸(L)，

(g)位置445处的苏氨酸(T)，

(h)位置503处的脯氨酸(P)，

(i)位置587处的F(苯丙氨酸)，

(j)位置620处的A(丙氨酸)，

(k)位置623处的L(亮氨酸)，

(l)位置624处的T(苏氨酸)，

(m)位置632处的I(异亮氨酸)，

(n)位置692处的Q(谷氨酰胺)，

(o)位置702处的L(亮氨酸)，

(p)位置781处的I(异亮氨酸)，

(q)位置810处的K(赖氨酸)，

(r)位置908处的L(亮氨酸)，

(s)位置931处的V(缬氨酸)，

(t)位置933处的N/Q(天冬酰胺或谷氨酰胺)，

(u)位置954处的K(赖氨酸)，

(v)位置955处的V(缬氨酸)，

(w)位置1000处的K(赖氨酸)，

(x)位置1100处的V(缬氨酸)，

(y)位置1232处的Y(酪氨酸)，以及

(z)位置1236处的I(异亮氨酸)；

其中位置编号是通过针对SEQ ID NO：1125的序列比对确定的。

2.如权利要求1所述的合成的组合物，其中所述Cas内切核酸酶与选自由SEQ ID NO：86-170和511-1135组成的组的序列具有至少90％同一性。

3.如权利要求1所述的合成的组合物，其中所述Cas内切核酸酶包含与SEQ ID NO：1136-1730中任一个具有90％或更高同一性的结构域。

4.如权利要求1所述的合成的组合物，其中所述Cas内切核酸酶与异源多肽融合。

5.如权利要求4所述的合成的组合物，其中所述异源多肽包含核酸酶活性。

6.如权利要求4所述的合成的组合物，其中所述异源多肽是脱氨酶。

7.如权利要求1所述的合成的组合物，其进一步包含指导多核苷酸，所述多肽与所述指导多核苷酸形成复合物。

8.如权利要求2所述的合成的组合物，其中所述指导多核苷酸是单指导物，所述单指导物包含选自由SEQ ID NO：426-510组成的组的序列。

9.如权利要求2所述的合成的组合物，其中所述指导多核苷酸包含tracrRNA，所述tracrRNA包含选自由SEQ ID NO：341-425组成的组的序列。

10.如权利要求2所述的合成的组合物，其中所述指导多核苷酸包含crRNA，所述crRNA包含选自由SEQ ID NO：171-255组成的组的序列。

11.如权利要求2所述的合成的组合物，其中所述指导多核苷酸包含反重复序列，所述反重复序列包含选自由SEQ ID NO：256-340组成的组的序列。

12.如权利要求2所述的合成的组合物，其中所述指导多核苷酸指导物包含DNA。

13.如权利要求1所述的合成的组合物，其与表4-83中列出的PAM共有序列选择性杂交。