[发明专利]使用聚山梨酯纯化多肽的方法

权利要求书

1.一种用于从包含蛋白质和至少一种具有水解活性的杂质的样品中纯化蛋白质的方法，该方法包括以下步骤：

i)

a)将包含该蛋白质和至少一种具有水解活性的杂质的样品施加到色谱材料上，

b)将包含聚山梨酯的溶液施加到色谱材料上，和

c)从色谱材料中回收该蛋白质，

或

ii)

a)向包含该蛋白质和至少一种具有水解活性的杂质的样品中加入聚山梨酯，

b)将步骤a)的混合物施加到色谱材料上，和

c)从色谱材料中回收该蛋白质，

或

iii)

a)向包含该蛋白质和至少一种具有水解活性的杂质的样品中加入聚山梨酯，

b)将步骤a)的混合物施加到色谱材料上，

c)将包含聚山梨酯的溶液施加到色谱材料上，和

d)从色谱材料中回收该蛋白质。

2.一种用于降低样品中水解活性的方法，该样品包含蛋白质和至少一种具有水解活性的杂质，包括以下步骤：

i)

a)将包含该蛋白质和至少一种具有水解活性的杂质的样品施加到色谱材料上，

b)将包含聚山梨酯的溶液施加到色谱材料上，和

c)从色谱材料中回收该蛋白质，或

ii)

a)向包含该蛋白质和至少一种具有水解活性的杂质的样品中加入聚山梨酯，

b)将步骤a)的混合物施加到色谱材料上，和

c)从色谱材料中回收该蛋白质，或

iii)

a)向包含该蛋白质和至少一种具有水解活性的杂质的样品中加入聚山梨酯，

b)将步骤a)的混合物施加到色谱材料上，

c)将包含聚山梨酯的溶液施加到色谱材料上，和

d)从色谱材料中回收该蛋白质。

3.如权利要求1-2中任一项所述的方法，其中所述杂质是水解酶。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述杂质是酯酶。

5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中聚山梨酯选自聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯65或聚山梨酯80。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中聚山梨酯是聚山梨酯20或聚山梨酯80。

7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中将聚山梨酯添加至至少约0.001％(w/v)的终浓度。

8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中将聚山梨酯添加至约0.001％(w/v)至约10％(w/v)的终浓度。

9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，其中色谱材料是亲和色谱材料、阳离子交换色谱材料、阴离子交换色谱材料、疏水相互作用色谱材料或混合模式色谱材料。

10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中色谱材料是亲和色谱材料或阳离子交换色谱材料。

11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中色谱材料是亲和色谱材料，其选自蛋白质A色谱或以骆驼科动物来源的单结构域抗体片段作为配体的色谱材料。

12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中亲和色谱材料是CaptureSelect FcXL或MabSelect SuRe。

13.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中阳离子交换色谱材料是SP SepharoseFast Flow或Poros 50HS或Poros XS。

14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中该蛋白质是单克隆抗体。