[发明专利]复用型催化报告分子沉积

权利要求书

1.一种用于测试样品中一种或多种靶标的存在的方法，其包括：

(1)使正测试一种或多种靶标的存在的样品与一种或多种靶标特异性结合配偶体接触，其中每种靶标特异性结合配偶体连接到核酸链，并且其中具有不同特异性的靶标特异性结合配偶体连接到不同的核酸链；

(2)在一个或两个步骤中，使所述样品与(a)连接到核酸链的酶和(b)中间部分接触，所述中间部分包含能够与连接到所述靶标特异性结合配偶体的所述核酸链特异性结合的第一结构域；和能够与连接到所述酶的所述核酸链特异性结合的第二结构域；

(3)使来自步骤(2)的所述样品与包含可检测地标记的底物的底物缀合物接触，其中所述底物和所述可检测标记任选地使用可释放接头来连接；

(4)任选地使所述结合的酶失活；

(5)任选地检测来自所述结合的可检测标记的信号；以及

(6)任选地重复步骤(1)-(5)或其子集，并且在成像的步骤(5)之前任选地重复步骤(3)-(4)或其任何子集。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述中间部分的第二区域包含重复序列，每个所述序列都直接或间接地与连接到所述酶的所述核酸链的对应序列特异性结合。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述方法还包括通过核酸扩增反应来扩增与连接到步骤(1)的所述靶标特异性结合配偶体的所述核酸链结合的所述中间部分，以形成重复序列的扩增子，每个所述序列都直接或间接地与连接到所述酶的所述核酸链的对应序列特异性结合。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述核酸扩增反应包括基于发夹的串联聚合反应或基于发夹的树突聚合反应，任选地所述扩增反应是引物交换反应。

5.一种用于测试样品中一种或多种靶标的存在的方法，其包括：

(1)使正测试一种或多种靶标的存在的样品与一种或多种靶标特异性结合配偶体接触，其中每种靶标特异性结合配偶体连接到核酸链，并且其中具有不同特异性的靶标特异性结合配偶体连接到不同的核酸链；

(2)任选地去除未结合的靶标特异性结合配偶体；

(3)使来自步骤(1)或任选地步骤(2)的所述样品与连接到核酸链的酶接触，所述核酸链与连接到所述靶标特异性结合配偶体的所述核酸链互补；

(4)任选地去除连接到互补核酸链的未结合的酶；

(5)使来自步骤(3)或任选地步骤(4)的所述样品与包含可检测地标记的底物的底物缀合物接触，其中所述底物和所述可检测标记任选地使用可释放接头来连接；

(6)任选地去除未结合的底物缀合物；

(7)任选地使所述结合的酶失活；

(8)任选地对所述样品进行成像以检测所述结合的可检测标记；以及

(9)任选地重复步骤(1)-(8)或其任何子集，并且任选地如果使用多于一种靶标特异性结合配偶体，则在成像的步骤(8)之前重复步骤(1)-(7)或其任何子集。