[发明专利]用于生产具有抗肿瘤活性的细胞颗粒的方法

说明书

用于生产具有抗肿瘤活性的细胞颗粒的方法，包括分离来源自细胞群的细胞颗粒，该细胞群具有可以归因于人脂肪组织来源周细胞(AD‑PC)的表型，表达抗肿瘤TRAIL。

技术领域

本发明涉及一种用于在细胞疗法中生产具有抗肿瘤活性的细胞颗粒的方法，该方法可以离体实施。

背景技术

众所周知，成体祖细胞，包括具有归因于人脂肪组织来源周细胞(以下简称AD-PC)的表型的细胞群，可以用作携带生物活性分子的载体。

特别地，AD-PC可以携带所谓的“死亡配体”，即，属于肿瘤坏死因子超家族的分子家族。

其中，肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(以下简称TRAIL)分子可以诱导病变组织中的细胞死亡，因此对于TRAIL分子在某些生物医学领域的可能用途特别令人感兴趣。

从欧洲专利EP2424979中已知一种生产用于治疗肿瘤的药物的方法，该方法包括制备编码TRAIL分子的可溶性变体并稳定转染脂肪周细胞(AD-PC)的逆转录病毒载体。

携带TRAIL的AD-PC已经在体外和体内显示出对某些肿瘤的细胞毒活性，因此在癌症治疗方面特别令人感兴趣。

此外，术语“细胞颗粒”表示细胞活性的产物，由自发释放到细胞外的粒子组成。

这些粒子由全部或部分由磷脂组成的封闭圆形膜界定。此外，这些粒子的特征在于直径尺寸介于40nm和5000nm之间。

细胞颗粒可以来源自质膜的突起，该突起随后从质膜脱离。

或者，细胞颗粒可以来源于细胞内细胞器(称为内体)，随后通过内体膜与质膜融合而释放到细胞外。

或者，在细胞凋亡过程中，细胞颗粒可以来源自质膜的突起。

已知在由组成细胞颗粒的粒子的内腔或膜中，细胞颗粒可以包括源自产生细胞颗粒的细胞的分子。

然后，这些分子与细胞颗粒一起被输送到细胞外。

但是，这种现有技术受到一些问题的影响。

第一个问题是，出于治疗目的提供的在生物体内接种携带生物活性分子的活细胞的治疗的安全性仍在争论中，因为被接种细胞的命运无法预先控制，即，接种后细胞的行为是未知的。主要的不确定因素涉及被接种细胞不受控制的扩增的潜力，这可能导致健康器官受损和生理功能改变。

第二个问题是，出于治疗目的在生物体内接种携带生物活性分子的活细胞会触发接受生物体的排斥反应，从而使治疗本身无效。

第三个问题是，携带必须注入的生物活性分子的活细胞的使用需要产生大量细胞，因此成本很高。

发明内容

本发明的一个目的是改善现有技术。

本发明的另一个目的是出于抗肿瘤目的，提供一种用于生产源自产生TRAIL的AD-PC(AD-PC-TRAIL)的细胞颗粒的方法。

本发明的另一个目的是提供一种用于生产源自AD-PC-TRAIL的细胞颗粒而不影响TRAIL的抗肿瘤作用的方法。

本发明的另一个目的是提供一种用于生产源自AD-PC-TRAIL的细胞颗粒的方法，该方法减少了AD-PC-TRAIL的同时施用，从而限制了归因于AD-PC自身的对生物体的每种不良副作用。

本发明的另一个目的是提供一种用于生产源自AD-PC-TRAIL的细胞颗粒的方法，该方法减少了AD-PC-TRAIL的同时施用，从而使TRAIL的施用是大体上经济的。

根据一个方面，本发明根据权利要求1的特征提供一种用于生产具有抗肿瘤活性的细胞颗粒的方法。