[发明专利]微生物和精细化学品生产

权利要求书

1.衣康酸生产宿主微生物，其中微生物包含至少一个在ip基因座外部整合入微生物的基因组中的异源表达盒，其中表达盒包含

a)在有功能启动子的有效控制下的异源RIA1基因，和/或

b)在异源有功能启动子的有效控制下的RIA1基因。

2.衣康酸生产宿主微生物，其中宿主是包含表达盒的重组微生物，所述表达盒用于

-表达RIA1基因和/或

-表达至少两个选自ADI1、MTT1和TAD1的基因，

其中所述表达盒在整合位点处整合入微生物的基因组中，其中整合位点

a)位于左边界基因和右边界基因之间，其中在相应野生型微生物中，左边界基因和右边界基因的相应翻译起始密码子的相应第一核苷酸由最多51600个核苷酸分隔，

其中左边界基因编码具有乙酰-CoA合成酶活性的蛋白质，并且

其中右边界基因编码蛋白质，其由与SEQ ID NO.25具有至少21％同一性的氨基酸序列组成；和/或

b)距可读框的最近边界至多51600个核苷酸存在，所述可读框翻译成与SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.25中任一者具有至少30％序列同一性的氨基酸序列，和/或

c)位于可读框内部或替换可读框，所述可读框翻译成与SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.25中任一者具有至少30％序列同一性的氨基酸序列。

3.衣康酸生产宿主微生物，其中宿主是重组微生物，其

a)包含产生衣康酸的活跃衣康酸代谢途径，和

b)其中失活至少一个基因，其

i)编码与以下者具有至少30％序列同一性的蛋白质和/或

ii)其互补链在至少低严格性条件下与编码以下者的核酸序列杂交蛋白质序列SEQ IDNO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQ IDNO.15、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.23或SEQ ID NO.25中任一者。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的生产宿主微生物，其中与相同条件下培养的相应野生型菌株相比，

a)RIA1基因的表达水平增加至少50倍，和/或

b)至少两个选自ADI1、MTT1和TAD1的基因的表达水平增加至少1000倍，和/或

c)ITP1基因的表达水平增加最多500倍。