[发明专利]源自耐有机酸的酵母的新型启动子及使用其表达靶基因的方法在审
申请号: | 201980039165.0 | 申请日: | 2019-02-28 |
公开(公告)号: | CN112639104A | 公开(公告)日: | 2021-04-09 |
发明(设计)人: | 朴宰演;李泰荣;李气成;欧蒂·科威斯托仁;卡利·科乌兰塔 | 申请(专利权)人: | SK新技术株式会社 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N15/67;C12N9/04;C12N9/02;C07K14/39;C12P7/40 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 孙永梅;刘翠娥 |
地址: | 韩国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 源自 有机酸 酵母 新型 启动子 使用 表达 基因 方法 | ||
1.一种启动子,其包含SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的核苷酸序列。
2.一种重组载体,其包含权利要求1所述的启动子。
3.根据权利要求2所述的重组载体,其进一步包含终止子,所述终止子包含SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4的序列。
4.根据权利要求2所述的重组载体,其进一步包含编码靶蛋白的基因。
5.根据权利要求4所述的重组载体,其中所述靶蛋白是与有机酸产生相关的蛋白。
6.根据权利要求5所述的重组载体,其中所述靶蛋白是丙二酰辅酶A-还原酶或乳酸脱氢酶。
7.一种重组微生物,其中引入了权利要求2至6中任一项所述的重组载体。
8.根据权利要求7所述的重组微生物,其是酵母。
9.根据权利要求8所述的重组微生物,其是耐酸酵母YBC(KCTC13508BP)。
10.一种生产有机酸的方法,所述方法包括以下步骤:
(a)通过培养其中引入有权利要求5所述的重组载体的重组微生物来产生有机酸;和
(b)收集产生的有机酸。
11.一种重组菌株,其具有降低的乙醇生产能力,其中耐酸酵母YBC菌株(KCTC13508BP)中的g4423基因被缺失或减弱。
12.一种基因构建体,其中启动子和编码靶基因的基因可操作地彼此连接,所述启动子包括包含SEQ ID NO:1的核苷酸序列。
13.根据权利要求12所述的基因构建体,其进一步包括包含SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4的序列的终止子。
14.根据权利要求12所述的基因构建体,其中所述靶蛋白是与有机酸产生相关的蛋白。
15.根据权利要求12所述的基因构建体,其中所述靶蛋白是丙二酰辅酶A-还原酶或乳酸脱氢酶。
16.一种重组微生物,其具有引入到其染色体中的权利要求12所述的基因构建体。
17.根据权利要求16所述的重组微生物,其是酵母。
18.根据权利要求17所述的重组微生物,其是耐酸酵母YBC(KCTC13508BP)。
19.一种生产有机酸的方法,所述方法包括以下步骤:
(a)通过培养其中引入有权利要求14所述的基因构建体的重组微生物来产生有机酸;和
(b)收集产生的有机酸。
20.一种用于靶基因过表达的重组微生物,其中将靶基因插入YBC菌株(KCTC13508BP)的基因组中的g4423的启动子的下游,并且所述靶基因的表达由所述g4423的启动子调控。
21.根据权利要求20所述的重组微生物,其中引入所述靶基因以替代所述g4423基因。
22.根据权利要求20所述的重组微生物,其中所述靶基因是编码与有机酸产生相关的蛋白的基因。
23.根据权利要求22所述的重组微生物,其中所述与有机酸产生相关的蛋白是丙二酰辅酶A-还原酶或乳酸脱氢酶。
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