[发明专利]双特异性抗PSMA X抗CD28抗体及其用途

权利要求书

1.一种分离的双特异性抗原结合分子，其包括：

a)第一抗原结合结构域(D1)，所述第一抗原结合结构域结合人CD28的K_D小于约10^-6M，如在25℃下通过表面等离子体共振所测量的；以及

b)第二抗原结合结构域(D2)，所述第二抗原结合结构域特异性结合靶肿瘤细胞上的人前列腺特异性膜抗原(PSMA)的K_D小于约10^-9M，如在25℃下通过表面等离子体共振所测量的。

2.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗原结合分子，其中所述双特异性抗原结合分子与人T细胞的表面结合，其中EC₅₀小于约10^-6M，如通过体外FACS结合测定所测量的。

3.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗原结合分子，其中所述双特异性抗原结合分子与食蟹猴T细胞的表面结合，其中EC₅₀小于约10^-7M，如通过体外FACS结合测定所测量的。

4.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗原结合分子，其中所述双特异性抗原结合分子与表达PSMA的细胞系的表面结合，其中EC₅₀小于约10^-8M，如通过体外FACS结合测定所测量的。

5.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗原结合分子，其中当与抗PSMA X CD3双特异性抗体结合使用并在表达PSMA的靶细胞上测试时，所述双特异性抗原结合分子表现出共刺激效应。

6.根据权利要求5所述的分离的双特异性抗原结合分子，其中通过以下中的一个或多个示出了所述共刺激效应：(a)活化并引导人T细胞杀伤表达PSMA的靶细胞的能力；(b)在T细胞上上调PD-1的能力；(c)增加从PBMC释放细胞因子IFNγ和TNF的能力；(d)耗竭肿瘤细胞的能力；或(f)增强肿瘤清除的能力。

7.根据权利要求6所述的分离的双特异性抗原结合分子，其中通过以下中的一个或多个进一步示出了所述共刺激效应：(g)在基于T细胞/APC荧光素酶的报告基因测定中活化NFκB活性；或(h)使用原代CD4⁺T细胞/APC功能测定法来测量IL-2细胞因子产量。

8.根据权利要求1到7中任一项所述的分离的双特异性抗原结合分子，其中所述双特异性抗原结合分子与被工程化为表达CD28的细胞特异性结合，其中EC₅₀在约5.0nM到约10nM的范围内，如通过电化学发光检测平台所测量的。

9.根据权利要求1到7中任一项所述的分离的双特异性抗原结合分子，其中所述双特异性抗原结合分子与人上皮前列腺癌细胞系特异性结合，其中EC₅₀在约0.3nM到约5.0nM的范围内，如通过电化学发光检测平台所测量的。

10.根据权利要求1到9中任一项所述的分离的双特异性抗原结合分子，其中所述靶肿瘤细胞是前列腺癌细胞。

11.根据权利要求1到10中任一项所述的分离的双特异性抗原结合分子，其中所述第一抗原结合结构域(D1)包括：

a)包含在重链可变区(HCVR)内的三个重链互补决定区(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述重链可变区包括选自由SEQ ID NO：10、34和58组成的组的氨基酸序列；以及

b)包含在轻链可变区(LCVR)内的三个轻链互补决定区(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述轻链可变区包括选自由SEQ ID NO：18、42和66组成的组的氨基酸序列。