[发明专利]糖化蛋白传感器、测定方法、程序和传感器的制造方法

说明书

本发明提供一种糖化蛋白传感器，其具备固定化的蛋白酶、固定化的酮胺氧化酶和过氧化氢检测部。

技术领域

本发明涉及糖化蛋白传感器、测定方法、程序和传感器的制造方法。

背景技术

作为糖尿病的诊断和血糖控制的管理指标，进行糖化蛋白的测定。作为一例，在临床现场会频繁地测定糖化血红蛋白和糖化白蛋白。作为糖化蛋白的测定方法，已知电泳法、离子交换色谱法、亲和色谱法、免疫法、酶法，但期望准确、并且简便且迅速的测定，因此，近年来，酶法已成为主流。

一般的基于酶法的糖化蛋白的测定方法中，首先，在第一步骤中利用蛋白酶将蛋白质分解为氨基酸，在第二步骤中使酮胺氧化酶仅对这些氨基酸中的糖化氨基酸起作用而产生过氧化氢，在第三步骤中将该过氧化氢转换为显色反应并测定吸光度。

发明内容

在以往的糖化蛋白测定方法中，通过使蛋白酶和酮胺氧化酶共存而发生酶彼此的分解反应，因此难以以高精度进行测定。另外，以往的糖化蛋白测定方法中，用于测定的工序数多，因此存在如下问题：难以进行迅速的测定，并且根据检查人员的手法而容易产生测定误差。

根据本发明的一个实施方式，糖化蛋白或果糖胺传感器具备固定化的蛋白酶、固定化的酮胺氧化酶和过氧化氢检测部。

待测试样可以为溶液。溶液可以为体液，可以为体液来源的溶液，可以为体液的稀释液。溶液可以为并非体液(非体液来源)的溶液，可以为体液或体液来源的溶液与非体液来源的溶液的混合液。溶液可以为样品测定中使用的溶液，可以为用于校正的测定中使用的溶液。例如，溶液可以为标准液或校正液。

“体液”可以为血液、血清、血浆、淋巴液，可以为组织间液、细胞间液、间质液等组织液，可以为体腔液、浆膜腔液、胸水、腹水、心包液、脑脊液(髓液)、关节液(滑液)、眼房水(房水)。体液可以为唾液、胃液、胆汁、胰液、肠液等消化液，可以为汗液、泪液、鼻涕、尿液、精液、阴道分泌液、羊水、乳汁。体液可以为动物的体液，可以为人的体液。“体液”可以为包含动物来源的蛋白质的食品中的液体(牛奶、乳制品等)。体液可以为植物的体液、植物活体液或植物来源的液体。例如，体液可以为植物的果汁、蜜汁、树液。“体液”可以为溶液。

若干实施方式中，溶液可以包含生理缓冲液。溶液可以包含测定对象物。缓冲液可以为所谓的被称为Good’s缓冲液的缓冲液。缓冲液可以包含磷酸缓冲生理盐水(PBS)、N-三(羟甲基)甲基-2-氨基乙磺酸缓冲液(TES)。缓冲液可以包含2-吗啉代乙磺酸(MES)、3-吗啉代丙磺酸(MOPS)、2-羟基-3-吗啉代丙磺酸(MOPSO)、哌嗪-1,4-双(2-羟基-3-丙磺酸)二水合物(POPSO)、N-(2-乙酰胺)亚氨基二乙酸(ADA)、哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸)单钠(PIPES)、N-(2-乙酰胺)-2-氨基乙磺酸(ACES)、胆胺盐酸、N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸(BES)、N-三(羟甲基)甲基-2-氨基乙磺酸(TES)、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸(HEPES)、2-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基]乙磺酸钠(HEPES-Na)、乙酰胺甘氨酸、三(羟甲基)甲基甘氨酸(Tricine)、甘氨酸酰胺、N,N-二羟乙基甘氨酸(Bicine)、双(2-羟乙基)亚氨基三(羟甲基)甲烷(Bis-Tris)、N-环己基-3-氨基丙磺酸(CAPS)、N-环己基-2-羟基-3-氨基丙磺酸(CAPSO)、N-环己基-2-氨基乙磺酸(CHES)、3-[N,N-双(2-羟乙基)氨基]-2-羟基丙磺酸(DIPSO)、3-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基]丙磺酸(HEPPS)、2-羟基-3-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基]丙磺酸一水合物(HEPPSO)、N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸(TAPS)和2-羟基-N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸(TAPSO)中的任一种或混合液。