[发明专利]HSV-2-DELTA-gD疫苗及其生产和使用方法

说明书

分别提供了重组单纯疱疹病毒2(HSV‑2)疫苗载体，包含其的组合物和疫苗，以及其使用方法。

政府支持声明

本发明是在美国国立卫生研究院授予的编号为AI117321和AI007501的政府支持下完成的。政府在本发明中具有一定的权利。

背景技术

包括流感和HIV病毒感染在内的病原体感染对总体健康具有重大影响。已经为包括流感和HIV病毒感染两者在内的许多病原体开发了疫苗，但是它们都有缺点和局限性。因此，必须设计和评估新的疫苗策略。

发明内容

本文公开了新的和改进的基于HSV-2的疫苗，其用于多种抗原性靶标，包括流感和HIV。

提供了一种用于生产针对异源抗原的疫苗载体的工艺，所述工艺包括：

a)提供HSV-2基因组，其包括：

(i)编码HSV-2糖蛋白D的基因的全部或部分缺失，和

(ii)包含启动子-FP构建体的核酸，其中FP是编码荧光蛋白的核酸；

b)用(i)a)的HSV-2基因组和(ii)编码异源抗原的线性DNA片段共转染宿主细胞，所述共转染在所述HSV-2基因组和所述DNA片段之间发生等位基因重组的条件下进行；

c)筛选由b)产生的噬菌斑(plaque)，以鉴定在引发荧光蛋白荧光的激发光下不显示荧光的噬菌斑；

d)从c)中的不显示荧光的那些噬菌斑中回收重组HSV-2病毒或病毒粒子，以获得针对异源抗原的疫苗载体。

还提供了通过本文所述的工艺制备的具有编码异源抗原的基因组的重组单纯疱疹病毒2(HSV-2)。

还提供了一种重组单纯疱疹病毒2(HSV-2)，其具有(i)HSV-2糖蛋白D编码基因(称为ΔgD-2)在其基因组中的完全缺失和(ii)(a)编码：启动子、异源抗原信号序列、异源抗原或(b)编码：启动子、异源抗原。

还提供了一种重组单纯疱疹病毒2(HSV-2)，其具有(i)HSV-2糖蛋白D编码基因在其基因组中的部分缺失和(ii)(a)依次编码HSV-2gD信号序列、异源抗原、HSV-2gD跨膜结构域，任选地HSV-2gD胞质结构域，但不编码HSV-2gD胞外结构域，或(b)依次编码HSV-2gD信号序列、异源抗原和HSV-2gD的跨膜胞质尾区。

还提供了其中包含如本文所述的重组HSV-2病毒的分离的细胞，其中所述细胞不存在于人类中。

还提供了包含如本文所述的重组HSV-2病毒的疫苗组合物。

还提供了药物组合物，其包含如本文所述的重组HSV-2病毒和药学上可接受的载体。

还提供了一种引发和/或增强受试者中的免疫应答的方法，所述方法包括向受试者施用一定量的(i)如本文所述的重组HSV-2病毒；(ii)如本文所述的疫苗；或(iii)如本文所述的药物组合物，其量可有效引发和/或增强受试者中的免疫应答。

还提供了一种治疗受试者中的流感感染或降低受试者中流感感染的可能性的方法，所述方法包括向受试者施用一定量的(i)如本文所述的重组HSV-2病毒；(ii)如本文所述的疫苗；或(iii)如本文所述的药物组合物，其量可有效治疗受试者中的流感感染或降低受试者中流感感染的可能性。

还提供了一种治疗受试者中的HIV感染或降低受试者中HIV感染的可能性的方法，所述方法包括向受试者施用一定量的(i)如本文所述的重组HSV-2病毒；(ii)如本文所述的疫苗；或(iii)如本文所述的药物组合物，其量可有效治疗受试者中的HIV感染或降低受试者中HIV感染的可能性。