[发明专利]嵌合抗原受体细胞疗法中细胞因子释放综合征的抑制

权利要求书

1.一种携带嵌合抗原受体(CAR)的免疫效应细胞，其缺乏涉及细胞因子释放综合征的细胞因子或趋化因子或转录因子。

2.如权利要求1所述的细胞，其中所述细胞因子或趋化因子或转录因子缺乏是通过编码所述细胞因子或趋化因子或转录因子的基因的缺失或抑制来实现的。

3.如权利要求2所述的细胞，其中所述缺失或抑制是通过将所述CAR插入所述细胞因子或趋化因子或转录因子基因的基因座中来实现的。

4.如权利要求3所述的细胞，其中所述CAR是还包括选择性标志物的构建体的一部分。

5.如权利要求4所述的细胞，其中所述选择性标志物包括绿色荧光(GFP)基因、YFP基因、tCD34基因或tEGFR基因。

6.如权利要求1所述的细胞，其中所述细胞因子或趋化因子或转录因子缺乏是通过用转录激活因子样效应物核酸酶(TALEN)、锌指核酸酶(ZFN)或成簇的规律间隔的短回文重复(CRISPR)编辑使所述细胞因子或趋化因子基因缺失或受抑制来实现的。

7.如权利要求1所述的细胞，其中缺失或抑制是使用CRISPR实现的。

8.如权利要求1所述的细胞，其中缺失或抑制是使用Cas9-CRISPR实现的。

9.如权利要求8所述的细胞，其中所述Cas9作为mRNA或蛋白质递送到所述细胞中。

10.如权利要求8所述的细胞，其中所述Cas9作为mRNA递送到所述细胞中。

11.如权利要求8所述的细胞，其中所述Cas9作为蛋白质递送到所述细胞中。

12.如权利要求6至11中任一项所述的细胞，其中靶向待缺失或抑制的所述基因的指导RNA(gRNA)与所述Cas9同时递送。

13.如权利要求9-12中任一项所述的细胞，其中所述递送是通过电穿孔进行的。

14.如权利要求1所述的细胞，其中所述细胞因子或趋化因子或转录因子缺乏是通过转染一种或多种类型的小干扰RNA(siRNA)抑制所述细胞因子或趋化因子或转录因子基因转录物来实现的。

15.如权利要求1所述的细胞，其中所述细胞因子或趋化因子或转录因子缺乏是通过转导一种或多种类型的短发夹RNA(shRNA)抑制所述细胞因子或趋化因子或转录因子基因转录物来实现的。

16.一种表达至少一种嵌合抗原受体(CAR)的携带CAR的免疫效应细胞，其中：

·所述至少一种CAR插入细胞因子或趋化因子或转录因子基因或转录因子基因的基因座中；

·通过选自转录激活因子样效应物核酸酶(TALEN)、锌指核酸酶(ZFN)和成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)编辑的方法使所述细胞因子或趋化因子或转录因子基因缺失或受抑制；

·通过表达具有内质网(ER)结合系链的scFv，以结合ER中的所述细胞因子或趋化因子并阻止分泌来抑制所述细胞因子或趋化因子或转录因子；

·通过小干扰RNA(siRNA)的转染抑制所述细胞因子或趋化因子或转录因子基因转录物；或

·通过短发夹RNA(shRNA)的转导抑制所述细胞因子或趋化因子或转录因子基因转录物。

17.如权利要求1-15中任一项所述的细胞，其中所述细胞选自嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)、携带CAR的iNKT细胞(iNKT-CAR)以及携带CAR的自然杀伤(NK)细胞(NK-CAR)，或携带CAR的巨噬细胞。