[发明专利]使用重组疟疾蛋白VAR2CSA分离胎儿来源的循环细胞

权利要求书

1.一种用于鉴定生物样品中的滋养层和/或胎儿细胞的方法，所述方法包括：

a)使包含表达CSA的滋养层和/或胎儿细胞的生物样品与VAR2CSA多肽或其缀合物或融合蛋白接触；

b)检测与所述表达CSA的滋养层和/或胎儿细胞特异性结合的所述VAR2CSA多肽或其缀合物或融合蛋白。

2.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括步骤c)：从所述生物样品中分离与所述VAR2CSA多肽或其缀合物或融合蛋白特异性结合的所述表达CSA的滋养层和/或胎儿细胞。

3.根据权利要求1或2中任一项所述的方法，其进一步包括在先的步骤：从受试者例如妊娠的雌性受试者例如人类女性受试者获得包含表达CSA的滋养层和/或胎儿细胞的生物样品。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述生物样品是外周血或包含外周血。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述生物样品来源于妊娠的雌性受试者例如人类女性受试者。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，所述方法检测妊娠的雌性例如人类女性受试者的外周血中的循环滋养层和/或胎儿细胞。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述VAR2CSA多肽或其缀合物或融合蛋白包含可检测标记或诊断效应部分，例如荧光或放射性标记，和/或用于检测的承载体，例如磁珠。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述VAR2CSA多肽包含SEQ ID NO：55或SEQ ID NO：56或其具有结合可以呈现在蛋白聚糖(CSPG)上的硫酸软骨素A(CSA)的能力的片段或变体或由其组成。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述VAR2CSA多肽是VAR2CSA的片段，其由以下连续氨基酸序列组成：

a.ID1，和

b.DBL2Xb，和任选地

c.ID2a。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述VAR2CSA多肽结合蛋白聚糖(CSPG)上的硫酸软骨素A(CSA)的以KD测量的亲和力低于100nM，例如低于80nM，例如低于70nM，例如低于60nM，例如低于50nM，例如低于40nM，例如低于30nM，例如低于26nM，例如低于24nM，例如低于22nM，例如低于20nM，例如低于18nM，例如低于16nM，例如低于14nM，例如低于12nM，例如低于10nM，例如低于9nM，例如低于8nM，例如低于7nM，例如低于6nM或低于4nM。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述VAR2CSA多肽包含与以下序列中的任何一个氨基酸序列具有至少70、75、80、85、90或95％的序列同一性的氨基酸序列：SEQID NO：1的1-577，SEQ ID NO：3的1-592，SEQ ID NO：4的1-579，SEQ ID NO：5的1-576，SEQID NO：10的1-586，SEQ ID NO：11的1-579，SEQ ID NO：29的1-565，SEQ ID NO：34的1-584，SEQ ID NO：36的1-569，SEQ ID NO：37的1-575，SEQ ID NO：38的1-592，SEQ ID NO：41的1-603，SEQ ID NO：43的1-588，SEQ ID NO：44的1-565，SEQ ID NO：45的1-589，SEQ ID NO：48的1-573，SEQ ID NO：53的1-583，SEQ ID NO：54的1-569。