[发明专利]细胞的基因组异常评价方法

说明书

本发明提供一种细胞的基因组异常评价方法，无需评价的专业性，简便且迅速并且为非侵袭性的。基因组异常评价方法将在培养基中经培养的多能干细胞或由多能干细胞进行分化诱导而得的细胞作为被检验细胞，评价所述被检验细胞是否有基因组异常，且所述方法包括下述步骤：测定被检验细胞的培养上清液中的指标物质的存在量；以及基于所述指标物质的存在量来评价所述被检验细胞是否有基因组异常，所述指标物质为选自由脱氧胞苷、犬尿氨酸、腐胺、丙氨酸、半胱氨酸、胱硫醚及苏糖酸所组成的组群中的至少一个，基于所述至少一个指标物质的存在量来进行所述被检验细胞是否有基因组异常的评价。

技术领域

本发明涉及一种细胞的基因组异常评价方法，更详细来说，本发明涉及一种无需评价的专业性，简便且迅速并且为非侵袭性的细胞的基因组异常评价方法。

背景技术

诱导多能干细胞(Induced pluripotent stem cells，iPS细胞)或胚胎干细胞(Embryonic stem cell，ES细胞)等多能干细胞可分化为构成人体的所有细胞，作为再生医疗用的细胞供给源而备受关注。为了将这些细胞用于再生医疗用途，需要大量培养iPS细胞或ES细胞。另一方面已知，若这些细胞反复分裂，则基因组发生异常[染色体个数的异常、染色体的形状异常(染色体的一部分转移至其他染色体的异常、染色体的某部分的朝向相反的异常)]的危险增高(非专利文献1、非专利文献2)。对于基因组发生了异常的细胞来说，引起癌化的可能性也提高，因而必须在移值细胞之前确认是否未发生所述基因组异常。

作为染色体的解析法，通常采用下述方法：培养一定数量的细胞后，利用秋水仙酰胺(colcemid)溶液使分裂停止，以低渗溶液进行处理后，利用甲醇/乙酸等进行固定。然后，在载玻片(slide glass)上制作标本，进行吉姆萨染色(Giemsa stain)或G带/Q带处理等后，进行显微镜观察。参照非专利文献3(日本染色体基因检查Vol.32No.1 2014，pp60-89)。

日本专利特表2010-508815号公报(WO2008/066655号公报)中公开了下述方法：对培养与受精及着床有关的卵母细胞时、培养基中的成分进行分析，诊断染色体异常。所述公报中，对象细胞为卵母细胞，并无与多能干细胞有关的公开。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本专利特表2010-508815号公报

专利文献2：WO2008/066655号公报

非专利文献

非专利文献1：路易斯C.洛朗(Louise C.Laurent)等人，“人胚胎干细胞和诱导多能干细胞中的细胞增殖和多能性基因拷贝数在重编程和培养过程中的动态变化(DynamicChanges in the Copy Number of Pluripotency and Cell Proliferation Genes inHuman ES and iPS Cells during Reprogramming and Time in Culture)”，细胞-干细胞(Cell Stem Cell)8，106-118，January(一月)7，2011

非专利文献2：“筛选不同种族的人类胚胎干细胞，识别20号染色体赋予生长优势的微小扩增子(Screening ethnically diverse human embryonic stem cellsidentifies a chromosome 20minimal amplicon conferring growth advantage)”，自然-生物技术第29卷(Nature Biotechnology volume 29)，1132-1144(2011)