[发明专利]包含结合PCSK9的分子的组合物和使用方法

说明书

本公开提供了包含基于纤连蛋白的支架结构域蛋白的药物组合物，所述基于纤连蛋白的支架结构域蛋白结合例如前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶kexin‑9(PCSK9)。

相关申请

本申请要求2018年5月16日提交的美国临时申请第62/672,187号的权益和优先权，所述申请以引用方式整体并入本文。

技术领域

本公开涉及结合前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶kexin-9(PCSK9)的基于纤连蛋白的支架结构域蛋白，以及其药物组合物和使用方法。

背景技术

前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(PCSK9)是人类1号染色体上由PCSK9基因编码的酶。PCSK9与低密度脂蛋白颗粒(LDL)的受体结合。肝脏和其他细胞膜上的LDL受体(LDLR)结合并启动LDL颗粒从细胞外液进入细胞的内吞作用，从而降低循环LDL颗粒的浓度。如果PCSK9被阻断，则更多的LDLR被回收利用并存在于细胞表面上，由此从细胞外液中去除LDL颗粒。因此，阻断PCSK9可减低血液LDL颗粒浓度。

当他汀类药物和其他药物疗效不佳或耐受性差时，单克隆抗体PCSK9抑制剂阿利库单抗(alirocumab)和依伏库单抗(evolocumab)被批准每两周或每月皮下注射或输注一次，用于减低LDL颗粒浓度。对于每月一次的注射，需要几毫升的药品才能达到所需剂量。尽管具有较高浓度的活性剂的配制品可提供更理想的给药排程和体积，但是这些配制品受到溶解度限制、粘度增加和生物制剂的不稳定性(包括聚集和微粒形成的倾向)的阻碍。Carpenter JF等人,Overlookingsubvisible particles in therapeutic protein products: Gaps that maycompromise product quality,Journal of PharmaceuticalSciences第98卷,第4期(2008)。

需要靶向PCSK9并且有潜力实现更理想的给药排程、更小的体积和/或功效方面的改善，同时维持总体上安全且良好耐受的特性的药物组合物。

发明内容

本公开提供了包含纤连蛋白支架蛋白的组合物，所述纤连蛋白支架蛋白以高亲和力结合前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶kexin 9型(PCSK9)，并且可以高浓度稳定地配制以实现最大的生物效应和更方便的给药排程、给药体积以及对患者友好的递送装置。结合PCSK9的融合蛋白包含结合PCSK9的基序和人血清白蛋白(HSA)的氨基酸序列。结合PCSK9的基序和HSA氨基酸序列可表达为基因融合体或者是化学缀合的。

本文所述的结合PCSK9的基序基于adnectin，这是一种源自人第10纤连蛋白III型结构域(10Fn3)的蛋白质家族，经工程改造可实现高亲和力靶标结合。根据本公开，以高浓度稳定地配制结合PCSK9的融合蛋白，以实现最大的生物活性以及方便的给药排程和体积。组合物中结合PCSK9的融合蛋白的浓度为至少100mg/mL。在一些实施方案中，组合物中结合PCSK9的融合蛋白的浓度为至少约200mg/mL。在一些实施方案中，组合物中结合PCSK9的融合蛋白的浓度为至少约250mg/mL，或至少约275mg/mL，或至少约300mg/mL，或至少约350mg/L。在一些实施方案中，以约275mg至约325mg(例如，约300mg)的单位剂量施用结合PCSK9的融合蛋白。

如本文所述，结合PCSK9的基序包含(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列或其变体或者由其组成。结合PCSK9的基序以浓度依赖性方式以亚纳摩尔亲和力与人PCSK9结合。结合PCSK9的基序与人血清白蛋白(HSA)氨基酸序列化学缀合或C端融合。在各种实施方案中，结合PCSK9的基序在C端处与HSA氨基酸序列融合，并且可在结合PCSK9的基序与HSA氨基酸序列之间包含氨基酸的连接序列。