[发明专利]基于干细胞工程化INKT细胞的现成细胞疗法

权利要求书

1.工程化不变自然杀伤T(iNKT)细胞，其表达至少一种不变自然杀伤(iNKT)T细胞受体(TCR)和以下中的一种或两者：(1)外源自杀基因产物；和(2)所述细胞的基因组已被改变为消除至少一种HLA-I或HLA-II分子的表面表达，其中所述至少一种iNKT TCR从在经重组修饰的启动子区的转录控制下的外源核酸和/或内源不变TCR基因表达。

2.权利要求1的工程化iNKT细胞，其中所述细胞的基因组已被改变为消除至少一种HLA-I或HLA-II分子的表面表达。

3.权利要求1或2的工程化iNKT细胞，其中所述不变TCR基因产物是αTCR基因产物。

4.权利要求1至3中任一项的工程化iNKT细胞，其中所述不变TCR基因产物是βTCR基因产物。

5.权利要求1至4中任一项的工程化iNKT细胞，其中αTCR基因产物和βTCR基因产物两者都是表达的。

6.权利要求1至5中任一项的工程化iNKT细胞，其中至少一种不变TCR基因产物从外源核酸表达。

7.权利要求1至6中任一项的工程化iNKT细胞，其中所述外源自杀基因产物和/或所述外源核酸具有一个或多个针对在所述细胞中表达而优化的密码子。

8.权利要求1至7中任一项的工程化iNKT细胞，其中所述自杀基因产物是单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)、嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)、胞嘧啶脱氨酶(CD)、羧肽酶G2、细胞色素P450、亚麻苦苷酶、β-内酰胺酶、硝基还原酶(NTR)、羧肽酶A或诱导型胱天蛋白酶9。

9.权利要求1至8中任一项的工程化iNKT细胞，其中所述自杀基因是基于酶的。

10.权利要求9的工程化iNKT细胞，其中所述自杀基因编码胸苷激酶(TK)或诱导型胱天蛋白酶9。

11.权利要求10的工程化iNKT细胞，其中所述TK基因是病毒TK基因。

12.权利要求11的工程化iNKT细胞，其中所述TK基因是单纯疱疹病毒TK基因。

13.权利要求1至12中任一项的工程化iNKT细胞，其中所述自杀基因产物被底物激活。

14.权利要求13的工程化iNKT细胞，其中所述底物是更昔洛韦、喷昔洛韦或其衍生物。

15.权利要求1至14中任一项的工程化iNKT细胞，其中所述细胞包含编码多肽的外源核酸，所述多肽具有可被标记用于显像的底物。

16.权利要求15的工程化iNKT细胞，其中所述自杀基因产物是具有可被标记用于显像的底物的所述多肽。

17.权利要求1至16中任一项的工程化iNKT细胞，其中所述自杀基因是sr39TK或诱导型胱天蛋白酶9。

18.权利要求1至17中任一项的工程化iNKT细胞，其中所述iNKT TCR特异性结合α-半乳糖神经酰胺(α-GC)。

19.权利要求1至18中任一项的工程化iNKT细胞，其中通过破坏编码β-2-微球蛋白(B2M)、主要组织相容性复合体II反式激活物(CIITA)和/或单独的HLA-I和HLA-II分子的基因表达，所述iNKT细胞不表达表面HLA-I或HLA-II分子。