[发明专利]测量涂料组合物中的酶活性的方法

权利要求书

1.一种检测涂料组合物中的酶活性的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)使所述涂料组合物与培养基的表面接触，其中所述涂料组合物包括酶，并且所述培养基包括所述酶的底物；

(b)在允许所述酶与所述涂料组合物中的所述底物反应的条件下孵育与(a)的涂料组合物接触的所述培养基；以及

(c)监测与所述涂料组合物接触的所述培养基的一种或多种物理性质；

由此，所述培养基的所述一种或多种物理性质中的至少一种物理性质的变化指示所述酶的活性。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述涂料组合物包括膜。

3.根据权利要求1到2中任一项所述的方法，其中允许所述酶与所述底物反应的条件包括足以使所述酶与所述底物反应的时间段、适合酶活性的pH、合适的温度、适合酶活性的水分水平或其组合。

4.根据权利要求1到3中任一项所述的方法，其中所述一种或多种物理性质包括颜色性质、光学性质或其组合，并且任选地，所述光学性质包括所述培养基的不透明度和/或透明度。

5.根据权利要求1到4中任一项所述的方法，其中所述底物是生色底物、荧光底物和/或发光底物。

6.根据权利要求1到5中任一项所述的方法，其中所述酶促反应的产物是生色产物、荧光产物和/或发光产物。

7.根据权利要求1到6中任一项所述的方法，其中所述培养基进一步包括指示剂染料；

其中所述指示剂染料具有以下性质中的一种或多种：增强对比度以促进监测所述培养基的不透明度；结合所述底物；结合所述酶促反应的产物或对由所述酶的活性导致的所述培养基的pH变化作出响应；并且

任选地，所述指示剂染料选自包括以下各项的组：硫黄素、阿斯拉宗橙、阿斯拉宗蓝、甲苯胺蓝、亚甲基蓝、吖啶橙、派洛宁-G、原黄酮、天青A、荧光桃红B、甲酚紫、番红O、中性红、硫黄素T、耐晒红AL、亚甲基绿、若丹明B、若丹明6G、天蓝色B、吲哚蓝、亮甲酚蓝、4',6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐水合物、吖啶黄、吖啶黄素、派洛宁-Y、派洛宁-B、麦尔多拉蓝、尼罗蓝、尼罗红、新亚甲基蓝、甲基紫、三苯甲烷染料、甲基绿、结晶紫、维多利亚蓝、亮绿、碱性品红、新品红、乙基紫、孔雀绿草酸盐、喹哪啶红、频哪隐醇黄、频哪隐醇溴化物、频哪隐醇氯化物、2-[4-(二甲基氨基)苯乙烯基]-1-甲基喹啉鎓碘化物、2-[4-(二甲基氨基)苯乙烯基]-1-甲基吡啶鎓碘化物、全染料(stains-all)、苯并嘌呤、甲基绿、氯酚红、溴甲酚绿、溴甲酚紫、溴百里酚蓝、苯酚红、百里香酚蓝、甲酚红、茜素、媒染剂橙、甲基橙、甲基红、莱卡特染料(Reichardt's Dye)、刚果红、曙红蓝、脂肪棕B、橙G、间胺黄、萘酚绿B、亚甲基紫3RAX、苏丹橙G、桑色素、分散橙25、玫瑰酸，脂肪棕RR、氰胺氯化物、3,6-吖啶胺、6'-丁氧基-2,6-二氨基-3,3'-偶氮二吡啶、对品红碱、吖啶橙碱、甲醇碱及其任何组合。

8.根据权利要求2到7中任一项所述的方法，其中所述一种或多种物理性质的改变发生在所述膜下方的所述培养基中和/或所述膜周围的所述培养基中。

9.根据权利要求2到8中任一项所述的方法，其中在步骤(a)之前，所述膜不与液体接触。

10.根据权利要求1到9中任一项所述的方法，其中所述培养基是基本上平坦的，并且任选地，所述培养基选自包括以下各项的组：琼脂、明胶、聚乙烯醇、聚醚二醇、聚乙二醇单硬脂酸酯、二甘醇二硬脂酸酯、酯蜡、聚酯蜡、硝化纤维素、石蜡及其任何组合。

11.根据权利要求1到10中任一项所述的方法，其中通过自动化来辅助步骤(a)、(b)或(c)中的一个或多个步骤。