[发明专利]H5功能性长双歧杆菌婴儿亚种的组合物和使用方法

说明书

包含功能性H5簇的长双歧杆菌婴儿亚种(B.longum subsp.infantis)，包括以ATCC登录号PTA‑125180保藏的长双歧杆菌婴儿亚种EVC001，可以用于组合物中，用于改善婴儿和成人的肠道健康。

发明领域

本发明涉及选择和使用包含功能性H5基因簇(成功定殖于婴儿肠道所需的基因)的长双歧杆菌婴儿亚种(Bifidobacterium longum subsp.infantis)的方法和组合物，所述长双歧杆菌婴儿亚种包括以ATCC登录号PTA-125180保藏的长双歧杆菌婴儿亚种EVC001(“保藏的双歧杆菌”)。所述双歧杆菌可以配制成药物组合物、食品、益生菌或其组合。

背景技术

人乳包含处于不能被用作婴儿能量来源形式的大量复杂寡糖(HMO，其占高达15％的总干重)。在所有哺乳动物乳汁中发现的类似的复杂寡糖在本文中称为MMO。某些微生物，诸如长双歧杆菌婴儿亚种(B.infantis)具有消耗寡糖(如人乳或牛乳中存在的寡糖)的独特能力。参见，美国专利号8,198,872和美国专利申请公开号2013/0195803。婴儿双歧杆菌(B.infantis)是在分解HMO之前将其内化的生物的示例。其它微生物如两歧双歧杆菌(B.bifidum)会在细胞外分解HMO。当环境中存在HMO时，能破坏寡糖内部键的结合蛋白、转运系统和酶通过转录被诱导，以改变蛋白质表达概况。

长双歧杆菌长亚种(B.longum subsp.longum)和长双歧杆菌婴儿亚种(B.longumsubsp.infantis)在500万年前分化。基因组分析表明，使用HMO(婴儿双歧杆菌)相对于不使用HMO(长双歧杆菌)的能力似乎反映在5个HMO簇(H1-H5)的基因中。有人提出H1-H5对于描述婴儿双歧杆菌的营养偏好十分重要[LoCascio等.Annl Environ Microbiol(2010)76(22):7373-81]。

发明内容

含有具有H5基因簇的细菌的组合物：细菌的量

本发明提供了包含长双歧杆菌婴儿亚种和至少一种寡糖的组合物，所述长双歧杆菌婴儿亚种包含功能性H5基因簇，所述至少一种寡糖具有I型或II型核心，其中H5簇包含至少B1on_2175、Blon_2176和Blon_2177，更典型地，其中功能性H5簇包含Blon_2171、B1on_2173、B1on_2174、B1on_2175、B1on_2176、Blon_2l77和galT。具有功能性H5簇的生物体将运输和消耗LNB寡糖。在本发明的一个优选方式中，长双歧杆菌婴儿亚种是以ATCC登录号PTA-125180保藏的长双歧杆菌婴儿亚种EVC001。双歧杆菌可以100万cfu/g-5000亿cfu/g的浓度存在于本发明的组合物中，和/或双歧杆菌可以50亿cfu/g-1000亿cfu/g的浓度存在于本发明的组合物中，和/或双歧杆菌可以100亿cfu/g-500亿cfu/g的浓度存在于本发明的组合物中。或者，双歧杆菌可以5000万cfu/g–40或50亿cfu/g的浓度存在于本发明的组合物中。

活化的细菌-功能性

优选地，本发明组合物中的长双歧杆菌婴儿亚种是活化的。在本发明的组合物中，双歧杆菌优选包含LNB转运系统，所述LNB转运系统能够在寡糖水解之前内化一种或多种寡糖并且能够水解内化的寡糖，其中所述寡糖具有哺乳动物乳中存在的寡糖的结构，并且所述哺乳动物乳可以是人乳、牛乳、猪乳、兔乳、山羊乳、绵羊乳、骆驼乳或其混合物。与在复杂寡糖不存在的情况下培养的同一种的双歧杆菌相比，所述双歧杆菌对哺乳动物粘膜细胞的结合亲和力更高。

活化的细菌-基因表达