[发明专利]海藻酸中空微纤维

说明书

本发明提供芯层中包含抗体产生细胞(例如抗体产生CHO细胞)的抗体生产用的海藻酸凝胶纤维、和使用该海藻酸凝胶纤维的抗体的制造方法。由此，提供进一步的抗体的生产方法。

技术领域

本发明涉及抗体生产用的海藻酸凝胶纤维、该凝胶纤维的制造方法、和使用该凝胶纤维的抗体的制造方法。

背景技术

利用基因重组技术进行抗体生产。迄今为止，使用CHO细胞、Sp2/0细胞、NS0细胞或大肠杆菌等作为抗体产生细胞，产生了各种抗体。

尤其是，CHO细胞(来自中国仓鼠卵巢)是可进行悬浮培养的细胞，并且细胞的增殖速度快，通过CHO细胞的大量培养，容易大量生产目标蛋白质，因此被频繁用于抗体的培养。

近年来，在抗体药物的开发/制造中，要求解决抗体药物的稳定生产、低成本化，为了达到这些要求，产率更高的有效的生产系统(例如，连续生产方法、用于利用小规模生产设备产生必要量的抗体的新型培养技术等)的开发受到关注。

抗体产生细胞的培养是使抗体产生细胞株在旋转烧瓶等中唤醒细胞后，边控制培养基组成/温度/搅拌条件/气体交换/pH等培养条件边进行扩大培养，最终利用数千～1万升规模的大规模的生产培养罐进行培养。

在以高密度连续培养抗体产生细胞的情况下，有时细胞与培养液的分离方法、有效的氧的供给方法等成为问题。关于前者，研究使用重力沉降管或连续离心分离机进行分离的方法等，关于后者，研究通过装入培养罐内的多孔管的氧扩散法、在培养液中添加氧溶解度高的氟化碳等的各种方法，以谋求各种改善。然而，为了有效地生产抗体，还需要解决各种问题。

已知在芯部包含各种细胞的具有芯/壳结构的微纤维(专利文献1：国际公开第2011/046105号小册子)。

已知包含细胞层的中空(空心)微纤维、该微纤维的制造方法(专利文献2：国际公开第2015/178427号小册子)。

已知通过在海藻酸凝胶中空纤维的中空部培养悬浮在含有生物适应性聚合物的水溶液中的细胞来制作线状细胞凝集块的方法(专利文献3：日本特开2014-236698号公报)。

已知可将培养液供给至组织的各个部位的三维细胞结构体的制造方法和培养方法(专利文献4：日本特开2016-77229号公报)。

已知一种微管，其特征在于：具备内部包含细胞或水溶性化学物质、且最外层包含疏水性聚合物的半透膜(专利文献5：日本特开2017-77473号公报)。

已知使用具有双同轴层流的微流体装置，将胞外基质(ECM)蛋白质和分化细胞或体细胞干细胞制成胶囊的Meter(米)长度的芯-壳水凝胶微小纤维的制造方法(非专利文献1)。

已知使用由海藻酸盐和聚丙烯酰胺构成的双网络(DN)水凝胶，使机械特性和操作性提高的含细胞的水凝胶微纤维(非专利文献2)。

然而，在专利文献1～5以及非专利文献1和2中，关于将包含抗体产生细胞的芯层用包含具有高机械强度的海藻酸凝胶(优选具有较芯层高的机械强度的海藻酸凝胶)的壳层进行包覆而得到的具有高机械强度的海藻酸凝胶纤维、和使用该海藻酸凝胶纤维的抗体的制造方法，既没有公开也没有暗示。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2011/046105号小册子；

专利文献2：国际公开第2015/178427号小册子；

专利文献3：日本特开2014-236698号公报；

专利文献4：日本特开2016-77229号公报；

专利文献5：日本特开2017-77473号公报；

非专利文献

非专利文献1：Nature Materials., 12, 第584-590页, 2013年；