[发明专利]细胞培养方法及细胞培养装置

说明书

细胞培养方法包含在满足以下条件(I)及条件(II)中的至少一者的培养液(10)中培养细胞(8)的工序，条件(I)：上述培养液中的乳酸浓度小于7.5mM；条件(II)：上述培养液中的氨浓度小于2.5mM。

技术领域

本发明涉及细胞培养方法及细胞培养装置。

背景技术

近年来，在医药产品制造及再生医疗等领域中，需要人工地高效大量培养细胞或微生物。作为需要大量培养的细胞，可举出中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)等抗体产生细胞、胚胎干细胞(ES细胞)或人工多能干细胞(iPS细胞)等多能干细胞等。只要能够对这些细胞长期稳定地进行大量培养，就能够高效率地生产单克隆抗体等生物物质及来源于多能干细胞的分化诱导组织。

作为在工业上大量培养细胞的方法，考虑使用了旋转烧瓶等培养槽的悬浮搅拌培养。另一方面，在悬浮搅拌培养中，存在设备规模变大的倾向。因此，为了谋求削减成本，提高培养时的细胞密度是有效的。然而，已知的是，当不断提高细胞密度时，会抑制细胞的増殖。其原因在于，培养液(液体培养基)中的废物(代谢物)的浓度会因细胞的高密度化而上升，由此，细胞的増殖活性会降低。作为会对细胞造成影响的代表性废物，已知乳酸及氨。

因此，为了使细胞以高密度状态稳定増殖，优选除去蓄积于培养液中的乳酸及氨。与此不同，例如在专利文献1中，公开了一种细胞培养装置，其利用送液线来连接细胞培养槽与成分调整液槽，该送液线设置有视浓度差而使成分透过的培养液成分调整膜。在该细胞培养装置中，蓄积于培养液中的废物因向成分调整液侧移动，故而在培养液中的浓度会降低。同时，在培养中浓度降低的营养成分会从成分调整液向培养液移动，以进行补充。由此，培养液中的环境会被维持在适于细胞培养的状态。

[现有技术文献]

[专利文献]

专利文献1:国际公开第2015/122528号

发明内容

[发明要解决的课题]

专利文献1所公开的细胞培养装置利用透析的原理来从培养液中除去了废物。因此，为了实现充分的废物除去，将成分调整液槽的容积设定为了细胞培养槽的容积的10倍以上。此外，未对培养液中的乳酸及氨的浓度进行监测。即，在调整乳酸浓度及氨浓度这方面上，针对从细胞培养槽向成分调整液槽输送培养液的定时及量等，并未进行充分的讨论。因此，存在必要液量巨大，会花费成本这样的问题。尤其是，在将培养液本身用于成分调整液的情况下，会大量地消耗高价的培养基，会花费更大的成本。

本发明鉴于这样的状况而完成，其目的之一在于，提供一种既能谋求低成本化又能大量培养细胞的技术。

[用于解决技术课题的技术方案]

为了解决上述问题，本发明的一个方案为细胞培养方法。该细胞培养方法包含在满足以下条件(I)及条件(II)中的至少一者的培养液中培养细胞的工序。

条件(I)：培养液中的乳酸浓度小于7.5mM。

条件(II)：培养液中的氨浓度小于2.5mM。

根据该方案，能够既谋求低成本化又大量培养细胞。

在上述方案中，细胞可以是多能干细胞。此外，条件(I)中的乳酸浓度可以为5mM以下。此外，条件(II)中的氨浓度可以为1mM以下。

本发明的另一方案为细胞培养装置。该细胞培养装置包括：培养容器；其收容细胞及培养液；以及调整部，其对培养液进行调整，使其满足以下条件(I)及条件(II)中的至少一者。

条件(I)：培养液中的乳酸浓度小于7.5mM。

条件(II)：培养液中的氨浓度小于2.5mM。