[发明专利]免疫刺激剂、其制造方法以及使用了免疫刺激剂的试剂盒和疫苗

说明书

本发明提供了一种免疫刺激剂，其具有得到改善的免疫刺激作用，并且含有壳聚糖和TLR(toll样受体)配体。

技术领域

本发明涉及一种免疫刺激剂及其应用。

背景技术

自然免疫系统是通过由模式识别受体(pattern recognition receptor，PRR)识别出通过细菌或病毒等保存的特征性分子模式(pathogen-associated molecularpattern，PAMP)来启动的。PRR中具有代表性的是Toll样受体(Toll-like receptor，TLR)，当微生物感染时，多个TLR配体会作为PAMPs(病原体相关分子模式)发挥作用以帮助激活自然免疫系统。自然免疫系统的启动与获得性免疫系统的激活相关，使得病原体被特异性地识别并记忆，从而在反复遇到同一病原体时可以进行有效排除。NKT细胞被与抗原呈递细胞表面的CD1d结合并呈递CD1d的糖脂(α-半乳糖基神经酰胺，α-GalCer)激活，桥接自然免疫系统和获得性免疫系统，以增强两者的功能。

作为在通过疫苗激活抗原呈递细胞的有效情况，可以列举出佐剂和抗原共同作用于同一抗原呈递细胞的情况。该情况下，可以得到用微粒等进行保护以防止抗原和佐剂被分解的效果(非专利文献1)。作为这种用于保护抗原和佐剂的微粒，聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly(lactic-co-glycolic acid)，PLGA)纳米颗粒由于具有生物相容性和生物降解性，从而被广泛使用(非专利文献2和3)。然而，为了制造PLGA纳米颗粒，有机溶剂的使用以及乳化等繁杂的操作是必不可少的。

专利文献1中记载了一种使用了颗粒状壳聚糖的免疫刺激剂，该颗粒状壳聚糖是使用阴离子表面活性剂而制造的。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：WO2018/025926号公报

非专利文献

非专利文献1：Hafner AM,Cortheesy B,Merkle HP.Particulate formulationsfor the delivery of poly(I:C)as vaccine adjuvant.Adv.Drug Deliv.Rev.65(2013)1386-1399.

非专利文献2：Silva AL,Soema PC,Slutter B,Ossendorp F,Jiskoot W.PLGAparticulate delivery system for subunit vaccines:Linking particle propertiesto immunogenicity.Hum.Vaccin.Immunother.12(2016)1056-1069.

非专利文献3：Dolen T,Kreutz M,Gileadi U,Tel J,Vasaturo A,van DintherEAW,van Hout-Kuijer MA,Cerundolo V,Figdor CG.Co-delivery of PLGA encapsulatedinvariant NKT cell agonist with antigenic protein induce strong T cell-mediated antitumor immune responses.Oncoimmunol.5(2016)e1068493.

发明内容

发明所要解决的课题

专利文献1中记载的颗粒状壳聚糖可以使用廉价的原料简单制备，并且其自身具有较强的佐剂活性。进而，推定这种颗粒状壳聚糖保护抗原使其难以在生物体内被分解，这种颗粒状壳聚糖作为使抗原呈递细胞吸收抗原的手段也是优异的。

但是，例如当以进一步增强免疫刺激作用或者改变免疫刺激作用的性质等为目的而与其它佐剂等组合使用时，颗粒状壳聚糖本身所表现出的作为佐剂的特性可能反而会带来不利影响。