[发明专利]来自生产增加量的活性CRZ1蛋白的酵母的增加的醇生产

权利要求书

1.一种衍生自亲本酵母细胞的经修饰的酵母细胞，所述经修饰的细胞包含遗传改变，所述遗传改变引起所述细胞与所述亲本细胞相比生产增加量的活性CRZ1多肽，其中在相同发酵条件下与所述亲本细胞生产的醇量相比所述经修饰的细胞在发酵过程中生产增加量的醇。

2.如权利要求1所述的经修饰的细胞，其中与在相同发酵条件下的天然CRZ1多肽相比，所述活性CRZ1多肽表现出减少的磷酸化。

3.如权利要求1或2所述的经修饰的细胞，其中与天然CRZ1多肽中的氨基酸残基相比，所述活性CRZ1多肽包括减少数量的能够磷酸化的氨基酸残基。

4.如权利要求3所述的经修饰的细胞，其中与天然CRZ1多肽中的氨基酸残基相比，所述活性CRZ1多肽包括减少数量的能够磷酸化的丝氨酸残基。

5.如权利要求1-4中任一项所述的经修饰的细胞，其中与在等同条件下生长的所述亲本细胞中的天然CRZ1多肽的表达水平相比，所述经修饰的CRZ1突变多肽的表达的增加量是至少约500％、至少1,000％、至少1,500％、或甚至至少2,000％。

6.如权利要求1-5中任一项所述的经修饰的细胞，其中所述细胞进一步包含所述磷酸转酮酶途径的一个或多个基因。

7.如权利要求6所述的经修饰的细胞，其中所述磷酸转酮酶途径的基因选自由以下组成的组：磷酸转酮酶、磷酸转乙酰酶、和乙酰化乙酰基脱氢酶。

8.如权利要求1-7中任一项所述的经修饰的细胞，其中所述细胞进一步包含编码碳水化合物加工酶的外源基因。

9.如权利要求1-8中任一项所述的经修饰的细胞，其进一步包含甘油途径和/或乙酰辅酶A途径中的改变。

10.如权利要求1-9中任一项所述的经修饰的细胞，其进一步包含用于制备醇的备选途径。

11.如权利要求1-10中任一项所述的经修饰的细胞，其中所述细胞属于酵母属物种。

12.如权利要求1-11中任一项所述的经修饰的细胞，其中所述醇是乙醇。

13.一种用于增加生长于碳水化合物底物上的酵母细胞的醇生产的方法，所述方法包括：向亲本酵母细胞中引入与亲本细胞中生产的量相比使活性CRZ1多肽的生产增加的遗传改变。

14.如权利要求13所述的方法，其中与在相同发酵条件下的天然CRZ1多肽相比，所述活性CRZ1多肽表现出减少的磷酸化。

15.如权利要求13或14所述的方法，其中与天然CRZ1多肽中的氨基酸残基相比，所述活性CRZ1多肽包括减少数量的能够磷酸化的氨基酸残基。

16.如权利要求15所述的方法，其中与天然CRZ1多肽中的氨基酸残基相比，所述活性CRZ1多肽包括减少数量的能够磷酸化的丝氨酸残基。

17.如权利要求13-16中任一项所述的方法，其中所述遗传改变导致如权利要求1-11中任一项所述的变体酵母或其变体。