[发明专利]包含IgG结合肽的固相担载体及IgG的分离方法

说明书

本发明的目的为提供将IgG结合肽固定化而得的固相担载体，所述IgG结合肽可用于IgG纯化，对IgG纯化后的碱溶液洗涤的重复具有耐性，并且IgG结合亲和性高，具体而言，本发明涉及将IgG结合肽固定化而得的固相担载体，其中，所述肽的外侧的2个半胱氨酸残基以下式所示的方式连接，式中，上部的半胱氨酸残基为所述肽中的N末端侧的半胱氨酸残基，并且下部的半胱氨酸残基为所述肽中的C末端侧的半胱氨酸残基。

技术领域

本发明涉及包含IgG结合肽的固相担载体、包含该固相担载体的IgG分离用柱、包含该固相担载体或柱的试剂盒、及使用该固相担载体或柱的IgG的纯化方法等。

背景技术

IgG抗体是目前最受瞩目的生物医药品之一。近年来，以IgG抗体为核心的抗体药物开始应用于医药领域，在工业用途、制药用途中的重要性逐渐提高。抗体的纯化中，蛋白A柱起到核心作用，大多数的抗体药物制造商引入了以该柱为核心的纯化体系。

然而，该蛋白A柱被指出了若干问题。一个问题是蛋白A向纯化抗体中的混入。蛋白A是来自细菌的蛋白质，施予至人体后的免疫原性高，并且存在混入内毒素的担忧。作为用于纯化IgG这样的医药品的亲和配体，为了避免混入不合适的物质，对于作为配体的蛋白A要求高的纯化度，这成为使用于医药品纯化的蛋白A柱的成本上升的主要原因。因此，期待开发新的亲和柱以代替蛋白A。

本申请的发明人此前报道了可利用介由二硫键环化而成的包含特定序列的肽配体(专利文献1)、或介由具有特定结构的接头将肽中的半胱氨酸残基的硫醚基交联而成的IgG结合肽(专利文献2)来纯化IgG。

然而，专利文献1中记载的肽配体存在由于碱溶液洗涤的重复而使亲和性降低的问题。另外，专利文献2中记载的IgG结合肽虽然与专利文献1中记载的肽配体相比具有高的耐碱性，但存在IgG结合亲和性低的问题。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2013/027796号

专利文献2：国际公开第2018/092867号

发明内容

发明所要解决的课题

鉴于上述实际情况，本发明的目的为提供将对IgG纯化后的碱溶液洗涤的重复具有耐性并且IgG结合亲和性高的IgG结合肽固定化而得的固相担载体。

用于解决课题的手段

为了解决上述课题而进行了锐意研究，结果发现，通过利用具有与专利文献2中记载的接头不同的特定结构的接头将IgG结合肽中的半胱氨酸残基的硫醚基进行交联，该肽的耐碱性及IgG结合亲和性显著改善，从而完成了本发明。

即，本发明包括以下内容。

(1)将肽固定化而得的固相担载体，所述肽的特征在于能与IgG结合，其中，

所述肽包含下式I表示的、由13～17个氨基酸残基组成的氨基酸序列，

(X_1-3)-C-(X₂)-H-(Xaa1)-G-(Xaa2)-L-V-W-C-(X_1-3)(I)

[式中，

X各自独立地为半胱氨酸以外的任意的氨基酸残基，

C为半胱氨酸残基，

H为组氨酸残基，

Xaa1为精氨酸残基、赖氨酸残基、亮氨酸残基或天冬酰胺残基或者它们的衍生物，

G为甘氨酸残基，

Xaa2为谷氨酸残基或天冬酰胺残基，

L为亮氨酸残基，