[发明专利]肌肉靶向复合物及其用于治疗弗里德赖希共济失调的用途

说明书

本公开内容的一些方面涉及包含与分子载荷共价连接的肌肉靶向剂的复合物。在一些实施方案中，所述肌肉靶向剂与肌细胞上的内化细胞表面受体特异性结合。在一些实施方案中，所述分子载荷提高FXN表达。在一些实施方案中，所述分子载荷是寡核苷酸，例如反义寡核苷酸或RNAi寡核苷酸。

相关申请

本申请要求2018年8月2日提交的标题为“MUSCLE TARGETING COMPLEXES ANDUSES THEREOF FOR TREATING FRIEDREICH’S ATAXIA”的美国临时申请No.62/714,035的申请日权益，其内容通过引用整体并入本文。

技术领域

本申请涉及用于向细胞递送分子载荷(molecular payload)(例如，寡核苷酸)的靶向复合物及其用途，特别是涉及疾病治疗的用途。

序列表的引用

本申请与电子格式的序列表一起提交。序列表以2019年7月31日创建的大小为56KB的名为D082470005WO00-SEQ.txt的文件提供。序列表的电子格式中的信息通过引用整体并入本文。

背景技术

弗里德赖希共济失调(Friedreich’s ataxia)是一种罕见的常染色体隐性遗传疾病，其导致肌肉组织和神经系统的进行性损伤。该疾病的标志包括严重的心脏病，例如肥厚型心肌病、心肌纤维化和心力衰竭，以及脊髓和周围神经系统中的神经纤维变性。弗里德赖希共济失调是由编码共济蛋白(frataxin)的FXN基因中的突变引起的，共济蛋白是被提出在铁稳态中发挥作用的蛋白质。特别地，患有该疾病的对象具有扩增的三核苷酸GAA序列，其导致降低的共济蛋白水平。弗里德赖希共济失调是遗传性共济失调的最常见形式，患病率为每50,000人中约1人。在最严重的情况下，患有该疾病的对象可能到10至20岁以后无法自由行走，并且许多对象具有缩短的预期寿命。在弗里德赖希共济失调中，FXN表达的降低可能归因于表观遗传沉默和/或剪接掉包含扩增的GAA重复的FXN前体mRNA的第一个内含子的能力降低。除了减轻(combat)疾病症状的支持性护理之外，目前没有可用于弗里德赖希共济失调的有效治疗。

发明概述

根据一些方面，本公开内容提供了靶向肌细胞以用于将分子载荷递送至那些细胞的复合物。在一些实施方案中，本文中提供的复合物对于递送提高FXN表达的分子载荷特别有用，例如在患有或怀疑患有弗里德赖希共济失调的对象中。因此，在一些实施方案中，本文中提供的复合物包含与肌细胞表面上的受体特异性结合的肌肉靶向剂(例如，肌肉靶向抗体)，以用于将分子载荷递送至肌细胞。在一些实施方案中，复合物通过受体介导的内化被摄取到细胞中，然后分子载荷可被释放以在细胞内部执行功能。例如，经工程化以递送寡核苷酸的复合物可以释放寡核苷酸，使得寡核苷酸可以提高肌细胞中的FXN基因表达。在一些实施方案中，通过连接复合物的寡核苷酸和肌肉靶向剂的共价接头的内体切割而释放寡核苷酸。

本公开内容的一些方面包括复合物，所述复合物包含与分子载荷共价连接的肌肉靶向剂，所述分子载荷配置成用于提高FXN表达，其中肌肉靶向剂与肌细胞上的内化细胞表面受体特异性结合，其中肌肉靶向剂与肌细胞上的内化细胞表面受体特异性结合。

在一些实施方案中，肌肉靶向剂是肌肉靶向抗体。在一些实施方案中，肌肉靶向抗体是与转铁蛋白受体的胞外表位(例如转铁蛋白受体的顶端结构域(apical domain)的表位)特异性结合的抗体。肌肉靶向抗体可与SEQ ID NO：1至3的C89至F760范围内的序列的表位特异性结合。在一些实施方案中，肌肉靶向抗体与转铁蛋白受体之结合的平衡解离常数(Kd)为10^-11M至10^-6M。

在一些实施方案中，复合物的肌肉靶向抗体与表1中列出的抗体竞争与转铁蛋白受体表位的特异性结合(例如以小于或等于10^-6M，例如10^-11M至10^-6M的Kd竞争与转铁蛋白受体表位的特异性结合)。