[发明专利]用抗体构建体预负载的冷冻保存的NK细胞

权利要求书

1.冷冻保存状态下的分离的人NK细胞，所述分离的人NK细胞在冷冻之前用抗体构建体预负载，所述抗体构建体至少包括与免疫效应细胞的细胞表面上的NK细胞受体抗原结合的第一结合结构域以及与靶细胞的细胞表面上的细胞表面抗原结合的第二结合结构域。

2.根据权利要求1所述的分离的人NK细胞，其中，所述NK细胞是从来自健康的供体的脐带或胎盘组织、iPSC或PBMC分离的。

3.根据权利要求1和2所述的分离的人NK细胞，其中，所述NK细胞被保存在冷冻溶液中。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的分离的人NK细胞，其中，所述NK细胞已被预负载在包括浓度为至少5nM的所述抗体构建体的溶液中。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的分离的人NK细胞，其中，所述抗体构建体的第一结合结构域所结合的所述NK细胞受体抗原选自由以下组成的组：CD16a、CD16b、NKp46、NKG2D以及CD16a+CD16b。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的分离的人NK细胞，其中，所述抗体构建体的第二结合结构域所结合的靶细胞的细胞表面上的细胞表面抗原选自由以下组成的组：CD19、CD20、CD22、CD30、CD33、CD52、CD70、CD74、CD79b、CD123、CLL1、BCMA、FCRH5、EGFR、EGFRvIII、HER2以及GD2。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的分离的人NK细胞，其中，所述抗体构建体包括与CD16a结合的第一结合结构域以及与选自由以下组成的组的抗原结合的第二结合结构域：CD19、CD20、CD22、CD30、CD33、CD52、CD70、CD74、CD79b、CD123、CLL1、BCMA、FCRH5、EGFR、EGFRvIII、HER2以及GD2。

8.根据权利要求7所述的分离的人NK细胞，其中，所述抗体构建体包括在所述第一结合结构域中的选自由以下组成的组的三种重链CDR和三种轻链CDR：

(a)如SEQ ID NO:29所示的CDR-H1、如SEQ ID NO:30所示的CDR-H2、如SEQ ID NO:31所示的CDR-H3、如SEQ ID NO:32所示的CDR-L1、如SEQ ID NO:33所示的CDR-L2、如SEQ ID NO:34所示的CDR-L3；

(b)如SEQ ID NO:40所示的CDR-H1、如SEQ ID NO:41所示的CDR-H2、如SEQ ID NO:42所示的CDR-H3、如SEQ ID NO:43所示的CDR-L1、如SEQ ID NO:44所示的CDR-L2、如SEQ ID NO:45所示的CDR-L3；

(c)如SEQ ID NO:51所示的CDR-H1、如SEQ ID NO:52所示的CDR-H2、如SEQ ID NO:53所示的CDR-H3、如SEQ ID NO:54所示的CDR-L1、如SEQ ID NO:55所示的CDR-L2、如SEQ ID NO:56所示的CDR-L3；

(d)如SEQ ID NO:62所示的CDR-H1、如SEQ ID NO:63所示的CDR-H2、如SEQ ID NO:64所示的CDR-H3、如SEQ ID NO:65所示的CDR-L1、如SEQ ID NO:66所示的CDR-L2、如SEQ ID NO:67所示的CDR-L3；

(e)如SEQ ID NO:73所示的CDR-H1、如SEQ ID NO:74所示的CDR-H2、如SEQ ID NO:75所示的CDR-H3、如SEQ ID NO:76所示的CDR-L1、如SEQ ID NO:77所示的CDR-L2、如SEQ ID NO:78所示的CDR-L3；

(f)如SEQ ID NO:84所示的CDR-H1、如SEQ ID NO:85所示的CDR-H2、如SEQ ID NO:86所示的CDR-H3、如SEQ ID NO:87所示的CDR-L1、如SEQ ID NO:88所示的CDR-L2、如SEQ ID NO:89所示的CDR-L3；以及

(g)如SEQ ID NO:95所示的CDR-H1、如SEQ ID NO:96所示的CDR-H2、如SEQ ID NO:97所示的CDR-H3、如SEQ ID NO:98所示的CDR-L1、如SEQ ID NO:99所示的CDR-L2、如SEQ ID NO:100所示的CDR-L3。