[发明专利]结合NKG2D、CD16和肿瘤相关抗原的蛋白质

权利要求书

1.一种蛋白质，其包含：

(a)结合NKG2D的第一抗原结合位点；

(b)结合肿瘤相关抗原c-MET的第二抗原结合位点；和

(c)足以结合CD16的抗体Fc结构域或其一部分，或结合CD16的第三抗原结合位点。

2.一种蛋白质，其包含：

(a)结合NKG2D的第一抗原结合位点；

(b)第二抗原结合位点，其结合选自KIT、F3、IGF1R、路易斯Y、MUC13、MUC4、MCAM、LRRC32、唾液酸-Tn、gpA33、GD3、GM2、c-MET、EPHA3、TNFRSF10A、TNFSF11、CD74和PMEL的肿瘤相关抗原；和

(c)足以结合CD16的抗体Fc结构域或其一部分，或结合CD16的第三抗原结合位点。

3.权利要求1或2的蛋白质，其进一步包含另外的抗原结合位点，其结合与第二肿瘤相关抗原结合位点相同的肿瘤相关抗原。

4.权利要求1-3中任一项的蛋白质，其中结合NKG2D的第一抗原结合位点是单链可变片段(scFv)，并且结合肿瘤相关抗原的第二抗原结合位点和/或另外的抗原结合位点是Fab片段。

5.权利要求1-3中任一项的蛋白质，其中结合NKG2D的第一抗原结合位点是scFv，并且结合肿瘤相关抗原的第二抗原结合位点和/或另外的抗原结合位点是scFv。

6.权利要求1或2的蛋白质，其中结合NKG2D的第一抗原结合位点是Fab片段，并且结合肿瘤相关抗原的第二抗原结合位点是scFv。

7.权利要求1或2的蛋白质，其中结合NKG2D的第一抗原结合位点是scFv，并且结合肿瘤相关抗原的第二抗原结合位点是Fab片段。

8.权利要求1-7中任一项的蛋白质，其中所述第一抗原结合位点与人中的NKG2D结合。

9.权利要求1-8中任一项的蛋白质，其中所述第一抗原结合位点、第二抗原结合位点和/或另外的抗原结合位点包含重链可变结构域和轻链可变结构域。

10.权利要求4-7中任一项的蛋白质，其中经由包含Ala-Ser的铰链，将结合肿瘤相关抗原的scFv和/或结合NKG2D的scFv连接至足以结合CD16的抗体恒定结构域或其一部分，其中所述scFv包含重链可变结构域和轻链可变结构域。

11.根据权利要求9-10中任一项的蛋白质，其中所述重链可变结构域与所述轻链可变结构域形成二硫桥。

12.根据权利要求11的蛋白质，其中在来自重链可变结构域的C44与来自轻链可变结构域的C100之间形成所述二硫桥。

13.根据权利要求10-12中任一项的蛋白质，其中经由柔性接头，将所述scFv重链可变结构域连接至所述轻链可变结构域。

14.根据权利要求13的蛋白质，其中在所述scFv内，所述柔性接头包含(G₄S)₄。

15.根据权利要求10-14中任一项的蛋白质，其中在所述scFv内，所述重链可变结构域位于所述轻链可变结构域的N末端或C末端处。

16.根据权利要求10-15中任一项的蛋白质，其中在所述scFv中，所述铰链进一步包含氨基酸序列Thr-Lys-Gly。