[发明专利]用于识别分析物的蛋白质纳米孔

权利要求书

1.嵌入金属的蛋白质纳米孔在识别样品中的分析物中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述嵌入金属的蛋白质纳米孔是嵌入一个或更多个含金属的离子的蛋白质纳米孔。

3.根据权利要求2所述的用途，其中所述一个或更多个含金属的离子选自由包含Au(III)、Zn²⁺、Co²⁺、Ag⁺、Cd²⁺、Ni²⁺、Au(I)、Cu²⁺、Cr³⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Pt(II)、Pd(II)、Mn²⁺、Hg²⁺、Ru(II)和Pb²⁺的离子组成的组。

4.根据权利要求3所述的用途，其中所述一个或更多个含金属的离子选自由[AuCl₄]^-、Zn²⁺、Co²⁺、Ag⁺、Cd²⁺、Ni²⁺、[AuCl₂]^-、Cu²⁺、Cr³⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Pt(II)、Pd(II)、Mn²⁺、Hg²⁺、Ru(II)和Pb²⁺离子组成的组。

5.根据权利要求4所述的用途，其中所述一个或更多个含金属的离子结合至所述纳米孔的内表面上的蛋氨酸、半胱氨酸、组氨酸或它们的任何组合。

6.根据权利要求5所述的用途，其中在所述纳米孔的内表面上结合至蛋氨酸、半胱氨酸、组氨酸或它们的任何组合的一个或更多个含金属的离子的数量为1、2、3、4、5、6、7或8。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的用途，其中所述蛋白质纳米孔是α-HL或MspA、CsgG、OmpG、溶细胞素A、ClyA、气溶素、Frac或Phi29连接子。

8.根据权利要求7所述的用途，其中MspA是突变八聚体MspA，所述突变八聚体MspA包括至少一个突变MspA单体，所述突变八聚体MspA在正电压下不具有自发门控活性并且在所述内表面上具有蛋氨酸、半胱氨酸、组氨酸或它们的任何组合。

9.根据权利要求8所述的用途，其中与野生型MspA单体相比，至少一个突变MspA单体包括第83-111位的一个或更多个突变；优选地，第83-111位的一个或更多个突变可以是第88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104和/或105位的一个或更多个突变；更优选地，与野生型MspA单体相比，至少一个突变MspA单体包括第88、91和/或105位的突变；更优选地，所述突变是突变为蛋氨酸、半胱氨酸或组氨酸；更优选地，与野生型MspA单体相比，至少一个突变MspA单体包括D91M、D91H或D91C突变；更优选地，与野生型MspA单体相比，至少一个突变MspA单体包括D93N/D91M/D90N/D118R/D134R/E139K、D93N/D91H/D90N/D118R/D134R/E139K或D93N/D91C/D90N/D118R/D134R/E139K突变。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的用途，其中所述分析物是含金属的分析物或核酸；优选地，所述含金属的分析物是含金属的离子。

11.根据权利要求10所述的用途，其中所述核酸是ssDNA、dsDNA、RNA或其组合。