[发明专利]核酸序列检测用装置在审

专利信息
申请号: 201980072820.2 申请日: 2019-10-18
公开(公告)号: CN112996899A 公开(公告)日: 2021-06-18
发明(设计)人: 蓼沼崇;宫内祐树;田口朋之 申请(专利权)人: 横河电机株式会社
主分类号: C12M1/34 分类号: C12M1/34;C12Q1/6818;C12Q1/6837;C12Q1/6874
代理公司: 北京天昊联合知识产权代理有限公司 11112 代理人: 常海涛;金小芳
地址: 日本*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 核酸 序列 检测 装置
【说明书】:

在没有供给靶标(30)的情况下,通过保持经由与检测序列的一部分核酸序列互补的互补序列的从固相面一侧的基端到另一基端的核酸序列的结合,使得通过接近于荧光分子(11)的消光分子(21)而使荧光分子(11)的荧光被消光。在供给了靶标(30)的情况下,所述靶标与检测序列结合并且使经由所述互补序列的结合被解除,消光分子(21)远离荧光分子(11)从而使荧光分子呈现荧光。

技术领域

本发明涉及一种利用杂交来检测包含在样本中的具有特定核酸序列的靶标的核酸序列检测用装置。

背景技术

作为利用杂交来检测包含在样本中的具有特定核酸序列的靶标的核酸序列检测方法,报告了使用荧光探针和消光探针并简化了核酸检测步骤的核酸序列检测方法(专利文献1)。在专利文献1的方法中,当不存在靶标时,通过保持荧光探针与消光探针经由存在于荧光探针和消光探针中的结合部的结合,使得接近于荧光分子的消光分子的荧光被消光。另一者面,当存在靶标时,靶标与存在于荧光探针或消光探针中的检测部结合,经由所述结合部的结合被解除,消光分子远离荧光分子因而使荧光分子呈现荧光。通过测定该荧光,可以检测包含在样本中的靶标。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:日本专利第5928906号公报

发明内容

本发明要解决的课题

然而,在专利文献1的方法中,通过存在于荧光探针和消光探针上的一部分的具有彼此互补的核酸序列的结合部,使得附加有荧光分子的荧光探针与附加有消光分子的消光探针结合。因此,荧光探针与消光探针的结合力较弱,消光分子对荧光的抑制不能说是充分的,因而不存在靶标时的荧光,即偏移光倾向于变高。当偏移光变高时,在靶标为低浓度的情况下,难以辨别荧光的变化,检测灵敏度降低。

另外,在专利文献1的方法中,需要适当地确定存在于荧光探针和消光探针上的一部分的具有彼此互补的核酸序列的所述结合部的核酸序列的长度。因此,当所述结合部的核酸序列过短时,荧光探针与消光探针无法经由所述结合部结合,从而荧光探针无法被消光探针消光。反之,当所述结合部的核酸序列过长时,荧光探针与消光探针经由所述结合部的结合过强,即使供给了靶标,荧光探针与消光探针也会保持结合而不会分离,从而无法检测样本中的靶标。

因此,本发明的目的在于提供一种通过降低不存在靶标时的偏移光来使检测灵敏度优异,并且可以在不依赖于荧光探针与消光探针之间的结合部的长度的情况下检测靶标的核酸序列检测用装置。

用于解决课题的手段

为了实现上述目的,本发明采用了以下构成。

[1]一种核酸序列检测用装置,其利用杂交来检测包含在样本中的具有特定核酸序列的靶标核酸序列检测用装置,具备:

在预定位置处附带有荧光分子的荧光探针、

在预定位置处附带有消光分子的消光探针、以及

基板,其具有固定所述荧光探针和所述消光探针的各自基端的固相面,

特征在于:

所述荧光探针或所述消光探针中的一者具有包含与所述靶标的核酸序列互补的核酸序列的检测序列,

所述荧光探针或所述消光探针中的另一者具有与所述检测序列的一部分核酸序列互补的核酸序列(以下也称为互补序列),从所述互补序列的固相面一侧的基端到另一基端的核酸序列与所述检测序列的一部分互补,

具有所述检测序列的所述荧光探针或消光探针比具有所述互补序列的荧光探针或消光探针的核酸序列长,

将所述荧光探针的基端和所述消光探针的基端固定在所述固相面上,使得位置关系成为通过接近于所述荧光分子的所述消光分子而使所述荧光分子呈现的荧光被消光。

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