[发明专利]用于重构具有毛囊的人皮肤组织的组合物、人皮肤组织模型动物及其制造方法

权利要求书

1.用于重构具有毛囊的人皮肤组织的组合物，其特征在于，

该组合物包含人表皮细胞和人真皮细胞，

其中，所述人真皮细胞包含经过了球状体形成的非胎儿来源的人毛乳头细胞的细胞群。

2.根据权利要求1所述的组合物，所述非胎儿来源的人毛乳头细胞是经Wnt信号激活剂刺激的非胎儿来源的人毛乳头细胞。

3.根据权利要求2所述的组合物，所述Wnt信号激活剂是Wnt配体家族蛋白质或Wnt激动剂。

4.根据权利要求3所述的组合物，所述Wnt配体家族蛋白质从Wnt1、Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b、Wnt6、Wnt7a、Wnt7b、Wnt8a、Wnt8b、Wnt9a、Wnt9b、Wnt10a、Wnt10b、Wnt11、Wnt16和它们的组合中选择。

5.根据权利要求3所述的组合物，所述Wnt激动剂是CHIR99021或BIO。

6.根据权利要求1～5的任一项所述的组合物，所述人真皮细胞包含人成纤维细胞。

7.具有毛囊的人皮肤组织模型动物，是对非人哺乳动物应用权利要求1～6的任一项所述的组合物而得的。

8.用于重构具有毛囊的人皮肤组织的组合物的制造方法，该方法包括：

工序(1)，制备包含非胎儿来源的人毛乳头细胞的球状体，

工序(2)，将所述球状体、人表皮细胞和人真皮细胞混合而进行培养。

9.根据权利要求8所述的方法，所述工序(1)在Wnt信号激活剂的存在下实施。

10.根据权利要求9所述的方法，所述Wnt信号激活剂是Wnt配体家族蛋白质或Wnt激动剂。

11.根据权利要求10所述的方法，所述Wnt配体家族蛋白质从Wnt1、Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b、Wnt6、Wnt7a、Wnt7b、Wnt8a、Wnt8b、Wnt9a、Wnt9b、Wnt10a、Wnt10b、Wnt11、Wnt16和它们的组合中选择。

12.根据权利要求10所述的方法，所述Wnt激动剂是CHIR99021或BIO。

13.根据权利要求8～12的任一项所述的方法，所述工序(1)通过悬滴法实施。

14.根据权利要求8～13的任一项所述的方法，所述非胎儿来源的人毛乳头细胞是成人来源的人毛乳头细胞。

15.根据权利要求8～14的任一项所述的方法，所述人真皮细胞包含人成纤维细胞。

16.根据权利要求8～15的任一项所述的方法，所述人表皮细胞是经细胞外基质蛋白质或其衍生物刺激的所述人表皮细胞。

17.根据权利要求16所述的方法，所述细胞外基质蛋白质包含层粘连蛋白或其片段。

18.根据权利要求8～17的任一项所述的方法，所述工序(2)是在具备多孔膜的培养基材上进行培养的工序。

19.具有毛囊的人皮肤组织模型动物的制造方法，包括将通过权利要求8～18的任一项所述的方法获得的组合物应用于非人哺乳动物的工序。

20.用于重构具有毛囊的人皮肤组织的组合物，是通过权利要求8～18的任一项所述的方法获得的。

21.具有毛囊的人皮肤组织模型动物，是通过权利要求19所述的方法获得的。