[发明专利]用于产生组织驻留记忆样T细胞的方法及其用途

权利要求书

1.一种用于产生组织驻留记忆样T细胞(T_RM样T细胞)的体外方法，所述方法包括：

(a)获得T细胞的起始群体；

(b)在低氧条件下或在低氧诱导剂的存在下培养所述T细胞的起始群体以产生早期效应细胞；和

(c)在转化生长因子β1(TGF-β1)的存在下进一步培养所述早期效应细胞以产生T_RM样T细胞。

2.权利要求1所述的方法，其中所述T细胞的起始群体是CD8⁺外周血T细胞。

3.权利要求2所述的方法，其中所述CD8⁺外周血T细胞是人CD8⁺外周血T细胞。

4.权利要求3所述的方法，其中获得所述人CD8⁺外周血T细胞包括从外周血样品中选择CD45RA⁺CCR7⁺CD8⁺幼稚T细胞。

5.权利要求4所述的方法，其中所述外周血样品获自健康受试者。

6.权利要求4所述的方法，其中所述外周血样品获自被诊断患有癌症或被怀疑患有癌症的受试者。

7.权利要求4所述的方法，其中所述外周血样品获自被诊断患有病毒性疾病或被怀疑患有病毒性疾病的受试者。

8.权利要求1所述的方法，其中在培养之前，通过负载肽、全长抗原或细胞裂解物的抗原呈递细胞刺激所述T细胞的起始群体。

9.权利要求8所述的方法，其中所述T细胞获自肿瘤部位或是肿瘤浸润淋巴细胞。

10.权利要求9所述的方法，其中所述T细胞是幼稚T细胞。

11.权利要求8所述的方法，其中所述细胞裂解物是肿瘤裂解物。

12.权利要求8所述的方法，其中所述抗原是癌症抗原或病毒抗原。

13.权利要求8所述的方法，其中所述肽是来自在癌细胞中差异表达的蛋白质的肽或由癌细胞高表达的蛋白质的肽。

14.权利要求8所述的方法，其中所述肽是来自新抗原或来自包含突变的蛋白质的肽。

15.权利要求8所述的方法，其中所述T细胞的起始群体富含对感兴趣的抗原具有特异性的T细胞。

16.权利要求8所述的方法，其中纯化T细胞的起始群体以富集CD8阳性和肽MHC四聚体阳性的细胞。

17.权利要求16所述的方法，其中通过荧光活化细胞分选纯化所述T细胞的起始群体。

18.权利要求1所述的方法，其中所述T细胞的起始群体是工程化T细胞的群体。

19.权利要求18所述的方法，其中通过将克隆的T细胞受体(TCR)引入宿主细胞群体中来产生所述工程化T细胞。

20.权利要求19所述的方法，其中所述宿主细胞是外周血单核细胞。

21.权利要求19所述的方法，其中通过非病毒方法将克隆的TCR引入所述宿主细胞群体。

22.权利要求21所述的方法，其中通过游离型载体或转座子将克隆的TCR引入所述宿主细胞群体。