[发明专利]用于在传感器表面上接种细胞的方法

说明书

本发明提供一种用于在生物传感器表面上接种细胞的方法，以及在其表面上具有接种的细胞的生物传感器用于测量细胞‑分子相互作用的用途。

技术领域

本发明涉及在生物传感器表面上接种细胞的方法，以及接种的细胞在测量分子细胞相互作用的方法中的用途。

背景技术

由于生物传感器尖端的面积很小，因此将活细胞与生物传感器相关联在技术上具有挑战性。将生物传感器面朝上放置时，尖端面积很小，无法容纳足够的细胞培养基，并且会很快变干。也无法将生物传感器面朝下放置，因为细胞沉积会导致细胞掉落到培养基底部，从而远离应附着的生物传感器。当前的方法涉及改变培养基的密度，以防止细胞随时间沉没，从而可能使它们与传感器表面相互作用并结合[参考文献]。由于诸如细胞培养条件变化、试剂的细胞毒性和细胞附着结果不一致等质量问题，用于实现该目的的试剂仍在开发中，并且不能在市场上买到。

因此，需要一种简单而稳健的方法来使活细胞在最佳细胞培养条件下与生物传感器缔合。

发明内容

在第一方面，本发明提供一种用于将细胞附着至传感器(4)的生物传感器表面(5)的方法，所述方法包括：

a)在液体接收单元(1)中提供细胞悬液，其中所述细胞悬液形成向所述液体接收单元(1)外部的表面(7)，

b)使生物传感器表面(5)与液体接收单元(1)中细胞悬液的表面(7)接触，并且

c)使细胞通过重力沉降在传感器表面(5)上，并使细胞粘附至生物传感器表面(5)。

在本发明方法的一实施例中，液体接收单元(1)通过粘附力和表面张力将细胞悬液保持在限定的区域/空间中。

在本发明方法的一实施例中，液体接收单元(1)包括选自由毛细管、微槽、微孔、微环、微丝弹簧或微突起组成的组的结构。

在本发明方法的一实施例中，液体接收单元(1)包括毛细管(3)，该毛细管连接至储液器(2)以形成液体接收单元(1)。

在本发明方法的一实施例中，毛细管(3)具有端部开口(6)，细胞悬液在该端部开口处形成向液体接收单元(1)外部的表面(7)，并且所述表面(7)与传感器表面(5)接触。

在本发明方法的一实施例中，毛细管(3)在端部开口(6)处具有疏水区，以防止细胞悬液排出。

在本发明方法的一实施例中，毛细管(3)至少填充有细胞悬液。

在本发明方法的一实施例中，液体接收单元(1)以包括多于一个液体接收单元(1)的阵列形式布置，优选地该阵列形式为96单元板形式，更优选地为96单元IMAPlate^TM。

在本发明方法的一实施例中，传感器(4)为具有传感器表面(5)的针状传感器。

在本发明方法的一实施例中，生物传感器表面(5)面朝上放置。

在本发明方法的一实施例中，在步骤c)中，使细胞沉降约1-24小时。

在本发明方法的一实施例中，生物传感器表面(5)包被有生物相容性基质以支持细胞附着和细胞生长。

在本发明方法的一实施例中，在用生物相容性基质包被之前，用溶剂例如丙酮预处理生物传感器表面(5)。

在本发明方法的一实施例中，生物传感器表面(5)包被有分子，该分子与待固定在传感器表面(5)上的细胞的表面分子特异性相互作用。

在第二方面，本发明提供一种用于测量测试分子与细胞之间的分子相互作用的方法，所述方法包括：

a)根据本发明的用于将细胞附着至传感器的生物传感器表面的方法，将细胞固定在生物传感器表面(5)上，