[发明专利]用于针对形态学特征和生物标志物表达而制备和分析细胞样品的方法和系统

权利要求书

1.一种在不执行单独的脱色步骤的情况下对Romanowsky型染色的细胞学样品中一种或多种生物标志物进行染色的自动化方法，所述方法包括：

对所述Romanowsky型染色的样品执行细胞前处理步骤，其包括将所述样品与细胞前处理溶液一起孵育至少5分钟，以获得经前处理和脱色的样品，以及

使所述脱色的样品与一种或多种生物标志物特异性试剂和一组检测试剂在一定条件下反应，所述条件足以使得在通过所述样品表达的生物标志物附近沉积明场标记或荧光标记。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞学样品以单层沉积在固体支持物上。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述固体支持物为显微镜载玻片。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述细胞前处理步骤包括使用碱性或酸性细胞前处理溶液进行的热诱导的表位修复(HIER)过程。

5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述细胞前处理步骤包括基于蛋白酶的表位修复(PBER)过程。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述明场标记或荧光标记为染料。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述染料通过亲和酶促反应被沉积。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述样品为全血样品，并且所述亲和酶促反应为单一亲和酶促反应。

9.根据权利要求7所述的方法，其中所述样品为全血样品，并且所述亲和酶促反应为多重亲和酶促反应，所述多重亲和酶促反应导致一组生物标志物被荧光染料鉴别染色。

10.根据权利要求7所述的方法，其中所述样品为全血样品，并且所述亲和酶促反应为多重亲和酶促反应，所述多重亲和酶促反应导致一组生物标志物被明场染料鉴别染色。

11.根据权利要求7至10中任一项所述的方法，其中所述亲和酶促反应选自由免疫酶染色、基因组原位杂交染色、mRNA原位杂交染色及其组合所组成的组。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述Romanowsky型染色的样品在基于醇的固定剂中固定。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述醇为甲醇。

14.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述Romanowsky型染色的样品在基于醛的固定剂中固定。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述醛为甲醛。

16.根据权利要求15所述的方法，其中基于所述甲醛的固定剂为中性缓冲的福尔马林。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的方法，其中所述一种或多种生物标志物特异性试剂包含至少一种生物标志物，所述至少一种生物标志物与包含SEQ ID NO 1-18中的一者的多肽或编码包含SEQ ID NO：1-18中的一者的多肽的核酸特异性地反应。