[发明专利]产生固定噬菌体

说明书

噬菌体共价连接到基底，通过(a)将(i)基底与(ii)噬菌体结合，其中在结合之前或在结合过程中，(i)或(ii)或(i)和(ii)两者被激活，并且其中(b)在结合过程中，噬菌体被包含在平均直径为150微米或更小的液滴中。

技术领域

本发明涉及将噬菌体固定在基底如颗粒、细丝和平面表面上的方法和设备以及由此制得的组合物。特别地，本发明涉及用于将噬菌体特别是固定在颗粒上的大规模方法。

背景技术

近年来，由于对常规抗生素的抗药性持续增长，并且由于环境原因，化学杀菌剂的应用变得越来越不可接受，因此人们已将注意力转向控制细菌污染的替代方法。一种有希望的方法涉及噬菌体的应用。

从WO 03/093462已知使用化学方法或放电将噬菌体连接到基底，从而产生例如共价连接到颗粒或聚合物条的噬菌体。

在WO 2007/072049中，将这些方法发展为使用脉冲场电晕放电；由放电激活的颗粒被滴入噬菌体溶液中。类似地，在WO 2012/175749中，将噬菌体溶液与激活种子结合。

重要的是，以这种方式固定的噬菌体保留了其抗菌效力，并且有利地，赋予了额外的稳定性，从而显著增强了对降解和干燥的抵抗力。

然而，已知方法存在许多问题。在现有技术中描述的方法中，通过使颗粒通过放电来激活颗粒会导致其过热和/或颗粒对设备的粘附。通常不可能控制每个颗粒的噬菌体数量或在平面或丝状基底上的连接均匀性，这导致不稳定和不一致的结果。另外，在细颗粒(必须以粉末形式处理)的情况下，目前尚无可确保将颗粒(包含细粉末)的表面快速可靠地与噬菌体并置从而进行固定的方法。使用放电产生的自由基的衰减很快，并且现有系统可能无法足够快地将基底和噬菌体聚集在一起，从而无法高效结合。

在现有技术中，仅批量制造方法是可行的。例如，将材料放置在浅的激活容器中，并从上方进行电晕激活，然后迅速使其与含有要固定的噬菌体的溶液接触。该方法或多或少对于在一个表面上发生固定的片状(平面)材料是可接受的，尽管它对于丝状和颗粒状材料也无效。不言而喻，例如，球形颗粒表面的某些方面可能比另一种具有更多数量的固定噬菌体，而更均匀的分布可能是优选的。在任何横截面的丝状材料中都可以看到类似的效果。

发明目的

本发明的一个目的是提供制备包含共价固定在基底上的噬菌体的组合物的替代方法。优选实施例的目的是提供改进的方法，特别是其中噬菌体更均匀地分布在其所连接的产物上。优选实施例的另一个目的是提供连接有噬菌体的新产物。优选实施例的又一个目的是提供可以连续使用的方法。设计实施该方法的设备是另外的目的。具体实施例的另一个目的是提供将激活的基底和噬菌体快速、连续且大规模地聚集在一起的方法和系统。

发明内容

因此，本发明提供了一种将噬菌体共价连接到基底的方法，包括：

a)在两个电极之间产生等离子体；以及

b)使流体在所述电极之间流动以使所述等离子体或所述等离子体的一部分移位到不在所述电极之间的移位区域；以及

c)(i)在所述基底未通过所述电极之间的情况下将所述基底引入所述移位区域的等离子体中，并将所述基底与所述噬菌体结合，或者(ii)在所述噬菌体未通过所述电极之间的情况下将所述噬菌体引入到所述移位区域中的等离子体中，并将所述噬菌体与所述基底结合。

用于执行这种方法的本发明的设备包括：

a)第一电极和第二电极以及用于在所述电极之间产生等离子体的等离子体发生器；

b)第一导管，所述第一导管连接到压力下的流体的供给源，用于在所述电极之间引入流体流，其中，所述流体的流动将所述等离子体或所述等离子体的一部分移位到不在所述电极之间的移位区域；