[发明专利]重组猪细小病毒抗原蛋白及其用途

说明书

本发明提供包含编码猪细小病毒VP2蛋白的基因的重组表达载体、由上述载体转化的重组植物体或重组昆虫细胞、包含从上述重组植物体或重组昆虫细胞获得的猪细小病毒VP2蛋白的针对猪细小病毒的疫苗组合物及用于猪细小病毒诊断的组合物。在利用本发明的重组植物体或重组昆虫细胞的情况下，可以高效地生产猪细小病毒抗原蛋白，利用上述重组植物体或重组昆虫细胞的猪细小病毒抗原蛋白生产方法比其他抗原生产方法表现出更优秀的安全性及稳定性。由于本发明的用于猪细小病毒诊断的组合物利用重组抗原蛋白，因而不存在因活病毒的处理而产生污染的可能性，因此很安全，并且可以在大量的试样中迅速诊断是否感染猪细小病毒。

技术领域

本发明是在韩国农林畜牧食品部支援下通过课题号1545016316来实现的，上述课题的研究主管机构为韩国农林畜牧检疫总部，研究项目名称为“农林畜牧检疫检查技术开发(RD)”，研究课题名称为“利用植物基因临时表达系统的新型猪细小病毒疫苗的开发”，主管机构为韩国农林畜牧检疫总部，研究期间为2018年01月01日～2018年12月31日。

本申请要求于2018年12月5日向韩国知识产权局提交的韩国专利申请第10-2018-0155084号的优先权，并且该专利申请的公开内容通过引用并入本说明书中。

本发明涉及重组猪细小病毒抗原蛋白及其用途。

背景技术

猪细小病毒(Porcine parvovirus，PPV)是一种无包膜(non-enveloped)、单链(single-stranded)、具有约5kb大小的小脱氧核糖核酸(DNA)的病毒，是引起猪繁殖障碍的病原体之一。自1965年在德国初次分离后，直到现在仍在包括欧洲、亚洲在内的世界各地流行。猪细小病毒血清型1型主要与繁殖障碍相关，代表性的临床症状有称为SMEDI综合征的死产(stillbirth)、胎儿干尸化(mummification)、胚胎死亡(embryonic death)以及不孕(infertility)。并且，除繁殖障碍外，还引起皮肤疾病、腹泻以及呼吸器官障碍，因此给养猪产业造成很多经济损失。

猪细小病毒感染症会导致母猪繁殖障碍，因此尽管在全世界范围内引发很多问题，但仍未根除。由此，为了最小化养猪农家的生产损失并提高怀孕母猪的分娩率，需要开发具有优秀功效且改善有效性的新型疫苗。

当前使用的猪细小病毒感染症诊断法有病毒中和试验(Virus NeutralizationTest，VNT)、酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA)、红细胞凝集抑制反应法(HI)等。当前为尝试家畜防疫事业的家畜血清检查及病情鉴定而提供的诊断液有红细胞凝集抑制(HI，Hemagglutination Inhibition)诊断液。红细胞凝集抑制诊断法必须利用动物(豚鼠(guinea pig))的血细胞，使用起来麻烦，具有为了采取血细胞而要长期饲养动物的困难。中和试验法存在需要在净化工作台(clean bench)培养猪细小病毒，需要3日～4日才能得到结果的问题。

发明内容

技术问题

本发明人进行了深入的研究和努力，以开发作为抗原蛋白具有优秀的抗原性及免疫原性的重组猪细小病毒抗原蛋白。其结果，优化(optimization)并合成猪细小病毒VP2基因的密码子(codon)，查明从由包含其的重组表达载体转化的重组植物体或重组昆虫细胞中获取的猪细小病毒VP2抗原蛋白具有很高的稳定性及免疫原性。

因此，本发明的目的在于，提供重组猪细小病毒VP2蛋白表达载体。

本发明的再一目的在于，提供表达重组猪细小病毒VP2蛋白的重组植物体或重组昆虫细胞。

本发明的另一目的在于，提供用于猪细小病毒疫苗的组合物。

本发明的还有一目的在于，提供用于猪细小病毒诊断的组合物。

本发明的又一目的在于，提供用于猪细小病毒诊断的试剂盒。