[发明专利]获得冷冻干燥的动物皮肤的方法，冷冻干燥的动物皮肤，其用途和试剂盒

权利要求书

1.获得冷冻干燥的动物皮肤的方法，其特征在于，所述方法包括在-30℃至-80℃的范围、内部压力低于50μmHg进行时间为2h至24h的冷冻干燥。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述动物皮肤优选地从鱼类中获得。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述鱼任选地为罗非鱼尼罗罗非鱼。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

i)清洁和修剪所述罗非鱼的所述皮肤；

ii)孵育和冲洗；

iii)冷冻；

iv)冷冻干燥；

v)真空密封；以及

vi)灭菌。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括使所述冷冻干燥的动物皮肤复水的步骤vii)。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(ii)包括用生物相容性洗涤剂孵育并冲洗；然后用杀菌剂孵育并冲洗；然后用脱毒溶液孵育并冲洗。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法在包含0.001％至0.5％的生物相容性洗涤剂的无菌环境中进行15-60分钟，重复二至五次，然后在同一容器中用无菌蒸馏水进行15-60分钟的二至五次孵育，其中所述生物相容性洗涤剂选自包括以下项的组：3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵]-1-丙烷磺酸盐、聚山梨酸酯20、叔辛基苯氧基聚乙氧基乙醇、脱氧胆酸钠或4-壬基苯基-聚乙二醇。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，用步骤(ii)中包括的杀菌剂在包含0.005％至1.0％(任选地0.01％至1％)的范围内的杀菌剂的无菌容器中孵育15-60分钟，然后在同一容器中用无菌蒸馏水冲洗并在无菌蒸馏水中孵育15至60分钟，重复二至十次；

其中所述杀菌剂选自包括以下项的组：葡萄糖酸氯己定、亚氯酸钠、氯化十六烷基吡啶、氯胺T和/或二氯异氰尿酸钠；任选地，所述杀菌剂为葡萄糖酸氯己定；以及

其中用步骤(ii)中包括的脱毒溶液在无菌容器中于0.025-0.50mol/L、pH为3.0-6.0孵育30-120分钟，重复二至十五次，然后在同一容器中用无菌蒸馏水孵育15-60分钟，重复二至十次；然后用生理盐水溶液冲洗，所述无菌容器包含乙酸/乙酸盐缓冲液或甘氨酸/HCl或柠檬酸/柠檬酸盐或磷酸二氢钠/磷酸氢二钠。

9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(iii)包括在-20℃至-196℃的范围内于8h至24h内冷冻。

10.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(iv)在冷冻干燥机中于-30℃至-80℃的范围内、内部压力低于50μmHg(任选地在30至35μmHg的范围内)进行2h至24h；任选地，冷冻干燥在-55℃、约30μmHg的压力下进行足以将生物组织的残留湿度降低至10％-15％的时间。

11.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在步骤(v)中，所述密封在0.15至0.20pm厚度的塑料包装中进行。

12.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在步骤(vi)中发生由钴60辐射器产生的γ辐射，剂量在5kGy和50kGy之间，并且任选地，可以通过具有在210nm和330nm之间变化的波长的紫外线辐射对所述皮肤进行消毒，曝光时间在10至100秒之间。

13.冷冻干燥的动物皮肤，其特征在于，所述冷冻干燥的动物皮肤通过权利要求1至12中任一项所定义的方法获得。