[发明专利]用于非病毒递送用于基因编辑和视网膜基因治疗的质粒DNA的聚(β-氨基酯)纳米颗粒

权利要求书

1.一种组合物，所述组合物包含式(I)或式(II)的聚(β-氨基酯)(PBAE)：

和至少一种包含编码基因编辑蛋白或治疗性蛋白的核酸序列的DNA或RNA分子；

其中：

n和m各自独立地是1至10,000的整数；

每个R独立地是具有以下结构的二丙烯酸酯单体：

其中R_o包含直链或支链的C₁-C₃₀亚烃基链，其可进一步包含一个或更多个杂原子或一个或更多个碳环基团、杂环基团或芳族基团，并且X₁和X₂各自独立地是直链或支链的C₁-C₃₀亚烃基链；

每个R*是选自由以下组成的组的三丙烯酸酯单体、四官能丙烯酸酯单体或六官能丙烯酸酯单体：

其中每个R'独立地是三价基团；

每个R独立地是包含伯胺、仲胺或叔胺的侧链单体；并且

每个R'独立地是包含伯胺、仲胺或叔胺的端基单体。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述基因编辑蛋白选自由以下组成的组：CRISPR相关核酸酶、Cre重组酶、Flp重组酶、兆核酸酶、转录激活因子样效应核酸酶(TALEN)、锌指核酸酶(ZFN)、或其天然或工程化变体、家族成员、直系同源物、片段或融合构建体。

3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述基因编辑蛋白是Cas9内切核酸酶。

4.根据权利要求3所述的组合物，其中所述组合物还包含gRNA或编码gRNA的DNA。

5.根据权利要求4所述的组合物，其中所述Cas9内切核酸酶和所述gRNA被编码在同一质粒上。

6.根据权利要求4所述的组合物，其中所述Cas9内切核酸酶和所述gRNA被编码在不同的质粒上。

7.根据权利要求1所述的组合物，其中所述治疗性蛋白选自由以下组成的组：CNGA3、CNGB3、GNAT2、sFLT01、Rab Escort蛋白(REP-1)、RS-1、RPE65、RPGR、MY07A、MERTK、ATP结合盒转运蛋白4(ABCA4)和SAR-421869。

8.根据权利要求1所述的组合物，所述组合物还包含启动子。

9.根据权利要求1所述的组合物，其中R选自由以下组成的组：

其中p、q和u各自独立地是1至10,000的整数。

10.根据权利要求9所述的组合物，其中R选自由以下组成的组：

11.根据权利要求10所述的组合物，其中所述二丙烯酸酯是双酚A甘油二丙烯酸酯(BGDA)(B7)。

12.根据权利要求1所述的组合物，其中所述式(II)的PBAE是：

13.根据权利要求1所述的组合物，其中所述三丙烯酸酯单体是三羟甲基丙烷三丙烯酸酯(TMPTA)：

14.根据权利要求1所述的组合物，其中R选自由以下组成的组：

15.根据权利要求14所述的组合物，其中R选自由以下组成的组：

16.根据权利要求1所述的组合物，其中R'是选自由以下组成的组的端基单体：

17.根据权利要求1所述的组合物，其中R'是选自由以下组成的组的端基单体：