[发明专利]使用逆转录病毒整合酶-Cas9融合蛋白通过定向非同源DNA插入进行的基因组编辑

权利要求书

1.一种融合蛋白，所述融合蛋白包含：

a)具有第一氨基酸序列的逆转录病毒整合酶(IN)或其片段；

b)具有第二氨基酸序列的CRISPR相关(Cas)蛋白；以及

c)具有第三氨基酸序列的核定位信号(NLS)。

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述逆转录病毒IN选自由以下组成的组：人免疫缺陷病毒(HIV)IN、劳斯肉瘤病毒(RSV)IN、小鼠乳腺肿瘤病毒(MMTV)IN、莫洛尼鼠白血病病毒(MoLV)IN、牛白血病病毒(BLV)IN、人嗜T淋巴细胞病毒(HTLV)IN、禽肉瘤白血病病毒(ASLV)IN、猫白血病病毒(FLV)IN、异嗜性鼠白血病病毒相关病毒(XMLV)IN、猿猴免疫缺陷病毒(SIV)IN、猫免疫缺陷病毒(FIV)IN、马传染性贫血病毒(EIAV)IN、原型泡沫病毒(PFV)IN、猿猴泡沫病毒(SFV)IN、人泡沫病毒(HFV)IN、大眼鲈皮肤肉瘤病毒(WDSV)IN和牛免疫缺陷病毒(BIV)IN。

3.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述逆转录病毒IN片段包含IN N末端结构域(NTD)和IN催化核心结构域(CCD)。

4.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述Cas蛋白选自由以下组成的组：Cas9、Cas13和Cpf1。

5.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述Cas蛋白是催化缺陷型的(dCas)。

6.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述NLS是逆转录转座子NLS。

7.如权利要求6所述的融合蛋白，其中所述逆转录转座子NLS是Ty1 NLS。

8.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述逆转录病毒IN包含与SEQ ID NO:1-40中的一者至少70％同一的序列。

9.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述逆转录病毒IN包含选自SEQ ID NO:1-40的序列。

10.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述Cas蛋白包含与SEQ ID NO:41-46中的一者至少95％同一的序列。

11.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述Cas蛋白包含选自SEQ ID NO:41-46的序列。

12.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述NLS包含与SEQ ID NO:47-56中的一者至少70％同一的序列。

13.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述NLS包含选自SEQ ID NO:47-56的序列。

14.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含与SEQ ID NO:57-98中的一者至少70％同一的序列。

15.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含选自SEQ ID NO:57-98的序列。

16.一种核酸分子，所述核酸分子编码如权利要求1-15中任一项所述的融合蛋白。

17.如权利要求16所述的核酸分子，其中所述核酸包含与SEQ ID NO:155-196中的一者至少70％同一的序列。

18.如权利要求16所述的核酸分子，其中所述核酸包含选自SEQ ID NO:155-196的序列。