[发明专利]用于清除衰老细胞的组合物

说明书

本发明涉及用于选择性清除衰老细胞的，包含能够抑制环氧合酶‑1(COX‑1)、环氧合酶‑2(COX‑2)和脂氧合酶中的至少两种的一种或多种抑制剂的组合物，或者包含能够抑制具有花生四烯酸‑CoA连接酶活性的酶，特别是长链脂肪酸‑CoA连接酶(ACSL)1、ACSL3、ACSL4、ACSL5、ACSL6、SLC27A2或ACSBG2或其组合的一种或多种抑制剂的组合物。本发明还涉及鉴定受试者中的衰老细胞的体外方法，以及鉴定用于选择性清除衰老细胞的候选化合物的方法。

技术领域

本发明涉及衰老细胞裂解剂(senolytics)领域，并提供了可用于选择性清除衰老细胞的组合物以及筛选衰老细胞裂解剂化合物的方法。

背景技术

人们发现衰老细胞在与年龄相关病理非常接近的衰老过程中在组织和器官中积累，其中衰老细胞在年龄相关疾病和病症的发生和发展中起着至关重要的作用。使用遗传学或药理学方法清除小鼠模型中的衰老细胞表明能够延长健康期，预防或延缓衰老相关疾病和病症的发生以及衰弱的发展。从那时起，已经鉴定出多种能够选择性清除衰老细胞的药理化合物，并且通常被称为“衰老细胞裂解剂(senolytics)”。

尽管细胞衰老是一种肿瘤抑制机制，在胚胎发育(-Espín等人2013)和伤口愈合(Demaria等人2014)中起着重要作用，但衰老过程中器官和组织中衰老细胞的慢性积累据信是年龄相关疾病和病症的发展和进展的主要驱动力。衰老细胞通过p53-p21^CIP1或通过p16^INK4a-Rb轴最终生长停滞，积累衰老相关β-半乳糖苷酶活性(SA-β-gal)，并显示出典型的形态(Campisi和d’Adda di Fagagna 2007)。当长期存在时，它们通过分泌促肿瘤和促炎的细胞因子、生长因子和蛋白酶的混合物对周围组织产生不利影响(Acosta等人2013，Coppé等人2010；Krtolica等人2001)，称为衰老相关分泌表型(SASP)。

先前的研究描述了与年轻细胞相比，花生四烯酸在衰老细胞内的水平降低，这是由于花生四烯酸向细胞外培养基中的释放增加(Lorenzini等人2000)。

与这些发现相反，WO2019070407A1公开了一种通过确定衰老细胞的指标，例如类花生酸或类花生酸前体花生四烯酸来鉴定哺乳动物中衰老细胞水平升高的方法。

利用p16^INK4a启动子可视化并选择性清除p16^INK4a阳性细胞的遗传小鼠模型令人信服地证明，衰老细胞在体内衰老过程中积累，并且清除p16^INK4a阳性细胞会延长健康期，并减小衰老相关疾病和病症的发生和发展(Baker等人2016；Baker等人2011)。有令人信服的证据表明衰老细胞与多种年龄相关疾病和病症之间存在着因果关系，例如动脉粥样硬化(Childs等人2016；Roos等人2016)、特发性肺纤维化(Lehmann等人2017；Schafer等人2017)、骨质疏松症(Farr等人2017；Zhu等人2015)、创伤后骨关节炎(Jeon等人2017)、肾衰老(Schmitt和Melk 2017；Valentijn等人2018)、皮肤老化(Baar等人2017；等人2018；Lewis等人201 1；Ressler等人2006；Yosef等人2016)、神经退行性疾病(Bussian等人2018)和脂肪形成受损(Xu等人2015)。此外，已表明，清除衰老细胞减轻了放射疗法和化学疗法诱导的衰老的不利影响并恢复组织功能(Baar等人2017；Chang等人2016；等人2013；Pan等人2017)。除了年龄相关疾病和病症外，细胞衰老还与化学疗法后的肿瘤复发(Milanovic等人2017)和移植器官的形成(Braun等人，2017年)有关，突出了衰老细胞裂解剂疗法的潜力。