[发明专利]通过发酵产生1,5-二氨基戊烷的经改造的生物合成途径在审
申请号: | 201980089266.9 | 申请日: | 2019-11-21 |
公开(公告)号: | CN113302297A | 公开(公告)日: | 2021-08-24 |
发明(设计)人: | A·米勒;汪志浩;J·梅林;M·S·侯赛因;S·埃德加 | 申请(专利权)人: | 齐默尔根公司 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88 |
代理公司: | 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 | 代理人: | 孙占华;张广育 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通过 发酵 产生 氨基 戊烷 改造 生物 合成 途径 | ||
1.一种表达非天然的赖氨酸脱羧酶的经改造的微生物细胞,其中所述经改造的微生物细胞产生1,5-二氨基戊烷。
2.权利要求1的经改造的微生物细胞,其中所述经改造的微生物细胞也表达非天然的1,5-二氨基戊烷转运蛋白。
3.权利要求1或权利要求2的经改造的微生物细胞,其中所述经改造的微生物细胞表达一种或多种额外的酶,所述酶选自额外的非天然赖氨酸脱羧酶和/或额外的非天然1,5-二氨基戊烷转运蛋白。
4.权利要求3的经改造的微生物细胞,其中所述额外的酶来自与权利要求1或权利要求2中相应酶不同的生物体。
5.权利要求3或权利要求4的经改造的微生物细胞,其中所述额外的酶包含权利要求1或权利要求2中相应酶的一种或多种额外拷贝。
6.权利要求1-5中任一项的经改造的微生物细胞,其中所述经改造的微生物细胞包括一种或多种上游赖氨酸途径的酶的提高的活性,所述提高的活性为相对于对照细胞的提高。
7.权利要求1-6中任一项的经改造的微生物细胞,其中所述经改造的微生物细胞包括一种或多种酶的提高的活性,所述酶提高了还原形式的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)的供应,所述提高的活性为相对于对照细胞的提高。
8.权利要求7的经改造的微生物细胞,其中增加了还原形式的NADPH的供应的一种或多种酶选自磷酸戊糖途径的酶、NADP+-依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)和NADP+-依赖性谷氨酸脱氢酶。
9.权利要求1-8中任一项的经改造的微生物细胞,其中所述经改造的微生物细胞包括一种或多种消耗一种或多种赖氨酸途径前体的酶的降低的活性,所述降低的活性为相对于对照细胞的降低。
10.权利要求1-9中任一项的经改造的微生物细胞,其中所述经改造的微生物细胞包括天然赖氨酸输出蛋白的降低的活性,所述降低的活性为相对于对照细胞的降低。
11.权利要求10的经改造的微生物细胞,其中所述天然赖氨酸输出蛋白为谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)lysE或其直系同源物。
12.权利要求1-11中任一项经改造的微生物细胞,其中所述经改造的微生物细胞包括谷氨酸棒状杆菌NCgl0561基因或其直系同源物的降低的表达,所述降低的表达是相对于对照细胞的降低。
13.权利要求1-12中任一项的经改造的微生物细胞,其中所述经改造的微生物细胞包括谷氨酸棒状杆菌trpB基因或其直系同源物的降低的表达,所述降低的表达是相对于对照细胞的降低。
14.权利要求9-13中任一项的经改造的微生物细胞,其中所述降低的活性是通过一种或多种选自以下的方式实现的:基因缺失、基因破坏、改变基因调控、用活性较低的启动子替换天然启动子。
15.经改造的微生物细胞,其中所述经改造的微生物细胞包括用于表达非天然赖氨酸脱羧酶的工具,且其中所述经改造的微生物细胞产生1,5-二氨基戊烷。
16.权利要求15的经改造的微生物细胞,其中所述经改造的微生物细胞还包括用于表达非天然1,5-二氨基戊烷转运蛋白的工具。
17.权利要求15或权利要求16的经改造的微生物细胞,其中所述经改造的微生物细胞包括表达一种或多种额外的酶的工具,所述额外的酶选自额外的非天然赖氨酸脱羧酶和/或额外的非天然1,5-二氨基戊烷转运蛋白。
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