[发明专利]用于生物合成大麻素的双向多酶支架

权利要求书

1.一种宿主细胞，其能够产生选自下组的一种或多种大麻素：大麻萜酚酸、大麻二酚酸和大麻环萜酚酸，所述宿主细胞包含至少三种不同的外源核酸，

其中所述第一和所述第二外源核酸各自编码选自下组的多个工程改造酶：乙酰-CoA乙酰转移酶、3-羟基丁酰-CoA脱氢酶、烯酰-CoA水合酶、β-酮硫解酶、反-烯酰-CoA还原酶、HMG-CoA合酶、HMG-CoA还原酶、甲羟戊酸激酶、磷酸甲羟戊酸激酶、二磷酸甲羟戊酸脱羧酶、异戊烯二磷酸δ异构酶、香叶基二磷酸合酶、橄榄醇合酶、橄榄酸环化酶和CBGA合酶；其中各所述工程改造酶包含异源相互作用域，所述异源相互作用域包含第一和第二肽基序，并且其中各所述异源相互作用域彼此不同；和

其中所述第三外源核酸编码包含多个肽配体的多肽支架，其中各所述肽配体包含能与所述异源相互作用域之一的所述第一或所述第二肽基序结合的氨基酸序列。

2.如权利要求1所述的宿主细胞，其中所述多个工程改造酶还包括ATP柠檬酸裂解酶和乙酰-CoA羧化酶。

3.如权利要求1所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞还包含编码大麻二酚酸合酶和大麻环萜酚酸合酶的外源核酸。

4.如权利要求1所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞还包含外源大麻二酚酸合酶。

5.如权利要求1所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞还包含外源大麻环萜酚酸合酶。

6.如权利要求1-5中任一项所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是细菌或酵母宿主细胞。

7.如权利要求6所述的宿主细胞，其中所述细菌细胞选自下组：大肠杆菌(Escherichiacoli)，芽孢杆菌(Bacillus)，短杆菌(Brevibacterium)，链霉菌(Streptomyces)和假单胞菌(Pseudomonas)细胞。

8.如权利要求6所述的宿主细胞，其中所述酵母细胞选自下组：巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)，酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，解脂耶氏酵母(Yarrowialipolytica)，马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)，和法夫驹形氏酵母(Komagataella phaffii)细胞。

9.如权利要求1-5中任一项所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是藻类或植物细胞。

10.如权利要求9所述的宿主细胞，其中所述藻类是杜氏盐藻(Dunaliella sp.)，小球藻(Chlorella variabilis)，易变眼虫(Euglena mutabilis)，或莱茵衣藻(Chlamydomonasreinhardtii)细胞。

11.如权利要求9所述的宿主细胞，其中所述植物细胞是大麻(Cannabis)或烟草细胞。

12.如权利要求1-11中任一项所述的宿主细胞，所述宿主细胞包含至少四种不同的外源核酸，其中所述第一、所述第二和所述第四核酸各自编码所述多个工程改造酶。

13.如权利要求1-11中任一项所述的宿主细胞，所述宿主细胞包含至少五种不同的外源核酸，其中所述第一、所述第二、所述第四和所述第五核酸各自编码所述多个工程改造酶。

14.如权利要求1-11中任一项所述的宿主细胞，所述宿主细胞包含至少六种不同的外源核酸，其中所述第一、所述第二、所述第四、所述第五和所述第六核酸各自编码所述多个工程改造酶。