[发明专利]使用主/复制阵列进行空间检测的方法在审
申请号: | 201980091989.2 | 申请日: | 2019-12-06 |
公开(公告)号: | CN113439124A | 公开(公告)日: | 2021-09-24 |
发明(设计)人: | P·肖 | 申请(专利权)人: | 10x基因组学有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6837 | 分类号: | C12Q1/6837;C12Q1/6841 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈扬扬;钱文宇 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 使用 复制 阵列 进行 空间 检测 方法 | ||
1.一种在基材上产生捕获探针阵列的方法,该方法包括:
提供包括多个孔的基材,所述多个孔中的孔具有凹陷表面;
将掩模施加到基材的不对应于所述多个孔的一个或多个区域;和
将多个捕获探针施加到多个孔中的孔,其中多个捕获探针中的捕获探针包含对于所述孔而言独特的条形码,从而使捕获探针的一端固定在所述孔的凹陷表面上。
2.根据权利要求1所述的方法,其中将多个捕获探针施加到孔包括光刻。
3.根据权利要求1或2所述的方法,还包括在将多个捕获探针施加于孔之前将多个引物施加于孔。
4.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述捕获探针包含对于所述孔而言独特的条形码。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述捕获探针包含裂解域、捕获域、功能域、独特分子标识符或其组合中的至少一个。
6.根据权利要求4所述的方法,其中,条形码包括第一部分和第二部分,并且其中,所述阵列的同一行中的捕获探针包括条形码的相同的第一部分,并且其中,所述阵列的同一列中的捕获探针包括条形码的相同的第二部分。
7.根据权利要求5所述的方法,其中,条形码在所述条形码的第一部分和第二部分之间包含其它核苷酸。
8.根据权利要求1所述的方法,其中,孔中捕获探针的密度为约800/μm2至10,000/μm2。
9.根据权利要求1或8所述的方法,其中,所述孔包含约10,000至300,000个捕获探针。
10.根据权利要求1、8或9中任一项所述的方法,其中所述孔具有20pL至500μL的体积。
11.根据权利要求1或8-10中任一项所述的方法,其中所述孔具有0.5μm至10μm的深度。
12.根据权利要求1或8-11中任一项所述的方法,其中所述孔具有0.5μm至10μm的在由基材表面限定的平面中测量的最大截面尺寸。
13.根据权利要求1或8-12中任一项所述的方法,其中所述孔包括圆柱形、杯形、底切或圆锥形。
14.根据权利要求1或8-13中任一项所述的方法,其中,所述基材上的多个孔的密度为约100个孔/mm2至1x104个孔/mm2。
15.根据权利要求1所述的方法,其中所述孔在由所述基材表面限定的平面中测量的最大截面尺寸为0.5μm至10μm,并且包括约10,000至30,000个捕获探针。
16.基材上的捕获探针阵列,该阵列包括:
包括多个孔的基材,所述多个孔中的孔包括具有多个固定的捕获探针的凹陷表面,其中多个固定的捕获探针包括共约10,000个至约300,000个的捕获探针,并且其中捕获探针包含对于所述孔而言独特的条形码,并且
其中,孔具有在由基材的表面限定的平面中测量的约0.5μm至约10μm的最大截面尺寸。
17.如权利要求16所述的阵列,其中,所述孔包括圆柱形、杯形、底切或圆锥形。
18.根据权利要求16或17所述的阵列,其中,所述基材上的多个孔的密度为约100个孔/mm2至1x104个孔/mm2。
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