[发明专利]修饰的正痘病毒载体

权利要求书

1.一种核酸，其包含重组痘苗病毒基因组，所述重组痘苗病毒基因组包含：

(a)在以下基因中的缺失：C2L、C1L、N1L、N2L、M1L、M2L、K1L、K2L、K3L、K4L、K5L、K6L、K7R、F1L、F2L、F3L、B8R、B14R、B15R、B16R、B17L、B18R、B19R及B20R；

(b)在以下基因中于3'反向末端重复序列(ITR)中的缺失：B21R、B22R、B23R、B24R、B25R、B26R、B27R、B28R及B29R；以及

(c)第一转基因，其包含编码特异性结合至细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)的抗体或其抗原结合片段的第一核苷酸序列；

其中所述C2L、F3L、B14R及B29R痘苗基因中的缺失为部分缺失。

2.如权利要求1所述的核酸，其进一步包含核苷酸序列，所述核苷酸序列包含可操作地连接于所述第一核苷酸序列的至少一个启动子。

3.如权利要求2所述的核酸，其中可操作地连接于所述第一核苷酸序列的所述至少一个启动子为H5R启动子、pS启动子或LEO启动子。

4.如权利要求2所述的核酸，其中可操作地连接于所述第一核苷酸序列的所述至少一个启动子为H5R启动子。

5.一种核酸，其包含重组痘苗病毒基因组，所述重组痘苗病毒基因组包含：

(a)在以下基因中的缺失：C2L、C1L、N1L、N2L、M1L、M2L、K1L、K2L、K3L、K4L、K5L、K6L、K7R、F1L、F2L、F3L、B14R、B15R、B16R、B17L、B18R、B19R和B20R，及任选地，在B8R基因中的缺失；

(b)在以下基因中于3'ITR中的缺失：B21R、B22R、B23R、B24R、B25R、B26R、B27R、B28R及B29R；

(c)第一转基因，其包含编码特异性结合至CTLA-4的抗体或其抗原结合片段的第一核苷酸序列；以及

(d)包含可操作地连接于所述第一核苷酸序列的至少一个启动子的核苷酸序列，其中可操作地连接于所述第一核苷酸序列的所述至少一个启动子为H5R启动子、pS启动子或LEO启动子；

其中所述C2L、F3L、B14R及B29R痘苗基因中的缺失为部分缺失。

6.如权利要求5所述的核酸，其中可操作地连接于所述第一核苷酸序列的所述至少一个启动子为H5R启动子。

7.如权利要求1-6中任一项所述的核酸，其中所述第一核苷酸序列与侧接所述第一核苷酸序列的内源性痘苗病毒基因呈相同取向。

8.如权利要求1-7中任一项所述的核酸，其中所述第一核苷酸序列编码包含SEQ IDNO:211中所列的氨基酸序列的氨基酸序列。

9.如权利要求1-8中任一项所述的核酸，其中所述第一核苷酸序列包含SEQ ID NO:214中所列的序列。

10.如权利要求1-8中任一项所述的核酸，其中所述第一核苷酸序列列举于SEQ ID NO:214中。

11.一种核酸，其包含重组痘苗病毒基因组，所述重组痘苗病毒基因组包含：

(a)在以下基因中的缺失：C2L、C1L、N1L、N2L、M1L、M2L、K1L、K2L、K3L、K4L、K5L、K6L、K7R、F1L、F2L、F3L、B8R、B14R、B15R、B16R、B17L、B18R、B19R及B20R；

(b)在以下基因中于3'ITR中的缺失：B21R、B22R、B23R、B24R、B25R、B26R、B27R、B28R及B29R；以及

(c)第二转基因，其包含编码白介素12(IL-12)多肽的第二核苷酸序列；

其中所述C2L、F3L、B14R及B29R痘苗基因中的缺失为部分缺失。