[发明专利]用于产生包含治疗剂或显像剂的细胞外囊泡的流体系统及相关方法

权利要求书

1.一种用于将至少一种治疗剂和/或显像剂加载到生产细胞(6)的细胞外囊泡(EV)的膜或腔中的流体系统(1)，其包括至少一个容器(4)、包含在容器(4)中的液体培养基(5)、生产细胞(6)、适合用于生产细胞(6)生长的液体培养基(5)的搅拌器(7)，其特征在于它还包括用于控制搅拌器(7)的速度的装置，并且搅拌器(7)和容器(4)的尺寸适于在容器(4)中产生液体培养基(5)的湍流，以将剪切应力施加到生产细胞(6)上，以便在通过流体系统(1)生产细胞外囊泡(EV)的同时将治疗剂或显像剂加载到所产生的细胞外囊泡的膜或腔中，湍流的柯尔莫哥洛夫长度小于100μm。

2.根据权利要求1所述的流体系统(1)，其中湍流的柯尔莫哥洛夫长度小于或等于80μm，优选小于或等于70μm，甚至更优选小于或等于60μm。

3.根据权利要求1或2所述的流体系统(1)，其包括出口(9)和连接到出口(9)的连接器(13)，连接器(13)能够包括液体培养基(5)和细胞外囊泡(EV)。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的流体系统(1)，其中液体培养基的搅拌器(7)是旋转式搅拌器，其旋转速度(s)、形状和尺寸与容器(4)的形状和尺寸相适应，以在容器中产生液体培养基(5)的湍流。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的流体系统(1)，其包括细胞外囊泡(EV)的分离器(15)，其与容器(4)流体连通以便能够将贫细胞外囊泡(EV)的液体培养基(5)重新引入容器(4)中。

6.一种用于将至少一种治疗剂和/或显像剂加载到生产细胞(6)的细胞外囊泡(EV)的膜或腔中的方法，其包括：

-控制搅拌器(7)的速度，使容器(4)中产生液体培养基(5)的湍流，从而对生产细胞(6)施加剪切应力，以便将治疗剂和/或显像剂加载到细胞外囊泡(EV)的膜或腔中，湍流的柯尔莫哥洛夫长度小于100μm，容器包括出口(9)、包含治疗剂和/或显像剂的液体培养基(5)、生产细胞(6)，和

-在容器(4)的出口(9)处收集包含细胞外囊泡(EV)的液体培养基(5)。

7.一种将至少一种治疗剂和/或显像剂加载到细胞外囊泡(EV)的膜或腔中的方法，其包括：

-在液体培养基(5)中提供细胞外囊泡(EV)，

-控制搅拌器(7)的速度，使容器(4)中产生液体培养基(5)的湍流，从而对囊泡施加剪切应力，以便将治疗剂和/或显像剂加载到细胞外囊泡(EV)的膜或腔中，湍流的柯尔莫哥洛夫长度小于100μm，液体培养基(5)包含治疗剂和/或显像剂。

8.一种将至少一种治疗剂和/或显像剂加载到生产细胞(6)的膜或细胞质中的方法，其包括：

-控制搅拌器(7)的速度，使容器(4)中产生液体培养基(5)的湍流，从而对生产细胞(6)施加剪切应力，以便将治疗剂和/或显像剂加载到生产细胞(6)的膜或细胞质中，在容器(4)中，湍流的柯尔莫哥洛夫长度小于100μm，该容器包括出口(9)、包含治疗剂和/或显像剂的液体培养基(5)、生产细胞(6)，和

-在容器(4)的出口(9)处收集包含细胞外囊泡(EV)的液体培养基(5)，和

-任选地，收集加载的生产细胞。

9.根据权利要求6至8中任一项所述的方法，其中，湍流的柯尔莫哥洛夫长度小于或等于80μm，优选小于或等于70μm，甚至更优选小于或等于60μm。

10.根据权利要求6至9中任一项所述的方法，其中将液体培养基(5)搅拌超过二十分钟。

11.根据权利要求6至10中任一项所述的方法，其中控制搅拌器以使液体培养基的流动恒定或间歇，强度增加或减少。