[发明专利]经修饰的尿激酶型纤溶酶原激活物多肽和使用方法

权利要求书

1.一种经修饰的尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)多肽，包含选自对应于取代R35Q、H37Y、V41R、V41L、Y40Q、D60aP、L97bA、T97aI和H99Q的一个或多个氨基酸修饰，以及其保守氨基酸修饰，其中相较于u-PA多肽的未修饰的活性形式，经修饰的u-PA多肽对补体蛋白具有增加的活性/特异性，其中：

氨基酸修饰选自经修饰的u-PA多肽一级序列中的取代、插入和缺失；

相较于不含有氨基酸修饰的未修饰的u-PA多肽，经修饰的u-PA多肽切割补体蛋白从而抑制或减少补体激活；

残基通过胰凝乳蛋白酶编号进行编号；

未修饰的u-PA多肽包括SEQ ID NO：1-6任一者所示的序列或其包括氨基酸取代的催化活性片段，SEQ ID NO：1-6示出野生型(WT)全长u-PA、WT蛋白酶结构域u-PA、WT成熟u-PA、带有胰凝乳蛋白酶编号的C122S的全长u-PA、带有C122S的蛋白酶结构域u-PA、带有C122S的成熟u-PA；和

保守修饰选自R35Y、W、F或N；H37R、Q、E、W或F；V41K；D60aS；T97aD、L或V；L97bG或S和H99N。

2.如权利要求1所述的经修饰的u-PA多肽，包含选自对应于R35Q、H37Y、V41R、V41L、Y40Q、D60aP、L97bA、T97aI和H99Q的取代的一个或多个氨基酸修饰。

3.如权利要求1或2所述的经修饰的u-PA多肽，其中所述经修饰的u-PA多肽切割纤溶酶原中的底物序列的活性或特异性降低。

4.如权利要求1-3中任一项所述的经修饰的u-PA多肽，其中所述补体蛋白是C3。

5.如权利要求1-4中任一项所述的经修饰的u-PA多肽，所述多肽切割C3的活性比包含SEQ ID NO：5的蛋白酶结构域的未修饰的u-PA多肽或如SEQ ID NO：1-4和6任一者所示的u-PA的对应形式高至少3倍。

6.如权利要求1-5中任一项所述的经修饰的u-PA多肽，其中所述未修饰的u-PA多肽由SEQ ID NO：1-6任一者所示的氨基酸序列组成。

7.如权利要求1-6中任一项所述的经修饰的u-PA多肽，其中所述未修饰的u-PA多肽由SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：5所示的氨基酸序列组成。

8.如权利要求1-5和7中任一项所述的经修饰的u-PA多肽，其中所述经修饰的u-PA多肽与SEQ ID NO：1-6任一者的多肽(WT全长u-PA、WT蛋白酶结构域u-PA、WT成熟u-PA、带有C122S的全长u-PA、带有C122S的蛋白酶结构域u-PA、带有C122S的成熟u-PA)或其催化活性片段有至少85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列相同性。

9.如权利要求1-5和7中任一项所述的经修饰的u-PA多肽，其中相较于SEQ ID NO：1-6任一者的未修饰的u-PA多肽或其催化活性部分，所述经修饰的u-PA多肽具有1个或多至2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15个氨基酸取代、插入或缺失。

10.如权利要求1-9中任一项所述的经修饰的u-PA多肽，包含取代V41R。

11.如权利要求1-9中任一项所述的经修饰的u-PA多肽，包含取代V41L。

12.如权利要求10或11所述的经修饰的u-PA多肽，还包含取代V38E。

13.如权利要求1-12中任一项所述的经修饰的u-PA多肽，包含取代H37Y。