[发明专利]可与油乳剂组合施用的免疫增强佐剂以及包含该佐剂的口蹄疫疫苗组合物

说明书

本发明涉及用于口蹄疫疫苗的佐剂组合物。本发明可通过同时诱导牛、猪等偶蹄动物的细胞免疫和体液免疫来诱导强免疫应答，用于预防和治疗口蹄疫爆发，安全和优化的佐剂组合物以及包含该佐剂组合物的疫苗组合物。此外，当口蹄疫爆发时，本发明可作为现场应急疫苗用于有效应对疫情，并可为偶蹄动物提供稳定的系统性疫苗。

技术领域

本发明涉及用于口蹄疫疫苗的免疫增强佐剂和包含该佐剂的疫苗组合物。更具体地说，本发明涉及用于增强口蹄疫疫苗免疫性的佐剂，该佐剂可与油乳剂组合施用，以及包含该佐剂的疫苗组合物。

背景技术

口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是一种高度传染性的病毒性疾病，主要影响偶蹄牲畜(即偶蹄目)，由于其传播速度快、死亡率高和生产力下降，给畜牧业造成重大经济损失。易感物种包括大约70种或更多的野生动物，包括反刍动物(反刍牲畜)，如牛、猪、水牛、骆驼、绵羊和山羊。这种疾病伴有高烧，已知会导致口腔、舌头、口鼻部、鼻子、乳头、蹄子和其他无毛皮肤部位起泡。

疫苗接种被用作控制口蹄疫发病国家的病理状况的一种手段，并在无口蹄疫国家制定应急计划方面发挥着重要作用。全世界的口蹄疫疫苗都使用死毒(灭活)疫苗，其中大多数通过随油佐剂(双油乳剂DOE或单油乳剂SOE)接种来提高有效性。然而，与牛相比，猪的抗体到防御水平的诱导期延迟、抗体滴度低、抗体持续时间短和免疫原性低被作为缺点指出。

口蹄疫疫苗目前主要集中在诱导体液免疫应答而不是细胞免疫应答，但其保护性能并不理想。口蹄疫疫苗的体液免疫应答(主要中和抗体IgG)诱导期为4至7天，而细胞免疫应答诱导期为数小时至3天。因此，在口蹄疫感染早期，诱导细胞免疫应答似乎比体液免疫应答更有效地保护宿主。此外，目前的口蹄疫疫苗需要每4至6个月定期接种一次，因为接种后抗体维持期短。特别是，当肌内注射接种猪时，存在安全性低和局部副作用的缺点，如在接种部位形成损害，如在接种部位形成纤维化和肉芽肿。另一方面，到目前为止，已在大量评估研究中开展了与口蹄疫疫苗相关的研究，以确定疫苗在牲畜品种中对牛而不是对猪的有效性。然而，据报道，猪通过疫苗接种的免疫原性低于牛。因此，克服市售疫苗局限性的理想疫苗设计应满足包括以下的要求：例如，同时诱导细胞和体液免疫，通过诱导记忆应答维持高抗体滴度，确保安全性以减少局部副作用，以及根据新策略等开发针对牲畜品种优化的佐剂。

在国外，Marcol 52、ISA 206和ISA 50主要用作商业化口蹄疫疫苗的佐剂。作为有效防御口蹄疫的佐剂相关研究，已进行了多种研究，如使用例如模式识别受体(PRR)配体，如R848、聚(I:C)、MDP、MPL、β-葡聚糖等，免疫增强剂，如菜籽油、人参根皂苷等，或者典型的商业佐剂(ISA201、ISA 206、Emulsigen-D、Carbigen等)，评估口蹄疫疫苗在猪和山羊中的有效性，但是，这些佐剂尚未诱导完全免疫。

除口蹄疫疫苗外，还努力通过主要使用人类疫苗同时诱导细胞和体液免疫来提高免疫原性，具体而言：1)疫苗递送系统，如油乳剂、表面活性剂、脂质体、病毒体、ISCOMs等；2)免疫增强剂，如皂苷、氢氧化铝、磷酸钾等；3)toll样受体(TLR)、RIG-I样受体(RLR)、核苷酸结合寡聚结构域(NOD)样受体(NLR)和受体特异性免疫刺激剂，如C型凝集素受体(CLR)配体；4)多种细胞因子如IL-1、IL-2、IL-6、IL-18、TNFα、IFNα、IFNγ和GM-CSF等已被研究并用作佐剂。其中一些材料目前用作预防和治疗多种人类疾病如癌症、肺结核、乙型肝炎、疟疾、流感、HIV和HSV的疫苗佐剂，或用于临床试验，但未用作口蹄疫的疫苗组合物。此外，由于多种佐剂具有不同的作用模式，因此根据可以诱导强烈的细胞和体液免疫应答的新策略，了解佐剂的免疫学机制对于FMD疫苗开发非常重要。

因此，本发明旨在通过开发在小鼠中具有佐剂功效的多种PPRR配体和细胞因子，通过诱导细胞和体液免疫应答诱导记忆免疫应答，提出根据新策略开发FMD疫苗的可能性，以及针对不同物种(偶蹄目，如牛和猪)的优化佐剂和用于口蹄疫的包含该佐剂的疫苗组合物。